人肝癌細胞；HepG2HepG2培養(yǎng)

細胞名稱  人肝癌細胞；HepG2[HepG2]培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細胞樣

品牌 貼壁生長　

特征特性 該細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結合蛋白；表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體；該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C76

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR

同工酶 同工酶鑒定

染色體

使用權限 A類
人肝癌細胞；HepG2[HepG2]培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據經驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
人肝癌細胞；HepG2[HepG2]培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線
Anti-Tubulin- Alpha/FITC 熒光素標記微管蛋白α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Caspase-8 (pro Mch5) 半胱氨酸蛋白酶8抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

鋅指蛋白300抗體 Anti-ZNF300 - middle 0.1ml

SLC9A9 英文名稱： 鈉氫通道蛋白9家族A9抗體 0.2ml

ERMAP 英文名稱： 紅細胞膜相關蛋白ERMAP抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IGF1R(Tyr980) 磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體 規(guī)格 0.1ml

Caspase-8 (pro Mch5) 半胱氨酸蛋白酶8抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
ssDNA(human single stranded DNA Antibody) ELISA Kit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-Insulin Receptor Beta (Tyr1361) 磷酸化胰島素受體β抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh LIS1 無腦回的致病基因LIS1抗體 規(guī)格 0.2ml

TBA(Human Total bile acide) ELISA Kit 人總膽汁酸 96T

RASSF7 英文名稱： RAS家族關聯(lián)結構域蛋白7抗體 0.2ml

C12ORF49 英文名稱： 12號染色體開放閱讀框49抗體 0.2ml

Anti-Phospho-Insulin Receptor Beta (Tyr1361) 磷酸化胰島素受體β抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

UCN(Urocortin)mouse ret 新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠) 0.5mg

IER5L 英文名稱： 即刻早期應答基因5樣蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Chemerin/TIG2 視黃酸受體應答蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-Calpain 2/FITC 熒光素標記鈣蛋白酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh TMPRSS4 膜型絲氨酸蛋白酶2抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-GZMA/FITC 熒光素標記顆粒酶A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人肝癌細胞；HepG2[HepG2]培養(yǎng)IL-1 Beta(Human Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 人白介素1βMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-GCS 谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

ANG(Human Angiogenin) ELISA Kit 人血管生長素 96T

Phospho-Rb (Ser807 + Ser811) 英文名稱： 磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體 0.1ml

Cytosine deaminase 英文名稱： 胞嘧啶脫酶抗體 0.2ml

Anti-GCS 谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人肝癌細胞；HepG2[HepG2]培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。