詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;DMS153[DMS153]培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 DMS153細(xì)胞株由O.S.Pettengill和G.D.Sorenson分離于一名患有小細(xì)胞肺癌44歲白人男性的肝臟組織,于1976年建系。DMS153細(xì)能分泌降血鈣素,人降鈣素基因相關(guān)肽,及促腎上腺皮質(zhì)激素等。該細(xì)胞在裸鼠及無胸腺小鼠中成瘤。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;DMS153[DMS153]培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;DMS153[DMS153]培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;DMS153[DMS153]培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-TSH/Biotin 生物素化促甲狀腺素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TrK A (h-NGFR) (p140- TrK A) 神經(jīng)生長因子的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
鼠抗鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體 Mouse Anti-YERSINIA PESTIS Monoclonal Antibody 0.1ml
S100A4 英文名稱: S100A4抗體 0.1ml
ETV3L 英文名稱: ETV3L蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKK beta(Ser471) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 規(guī)格 0.1ml
TrK A (h-NGFR) (p140- TrK A) 神經(jīng)生長因子的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Somatostatin/GRIH 生長抑素抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-BNP 腦鈉素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Perlecan/Heparan Sulfate Proteoglycan 2 乙酰肝素蛋白多糖2 規(guī)格 0.1ml
Collagen II二型膠原 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
TBX2 英文名稱: 血栓素B2(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因)抗體 0.2ml
Phospho-cdc25C (Thr48) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 0.1ml
Anti-BNP 腦鈉素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TSH(Mouse Thyroid Stimulating Hormone)ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素 96T
PCDH8 英文名稱: 原鈣粘附蛋白8抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ICAM5/encephalin 細(xì)胞間粘附分子5抗體 規(guī)格 0.1ml
MMP-13(Human Matrix metalloproteinase 13) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶13Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
C17orf66 英文名稱: 17號染色體開放閱讀框66抗體 0.2ml
Anti-OPN 骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)人Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;DMS153[DMS153]培養(yǎng)1,5-AG(Human 1,5-anhydroglucitol) ELISA Kit 人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Menin/Men1 Menin抑癌蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ITM2A 完整膜蛋白E25A抗體 規(guī)格 0.2ml
anti-PIV IgG (Human Poliomyelitis Virus) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgG抗體 96T
PA26 英文名稱: p53調(diào)控PA26核蛋白抗體 0.2ml
C22orf15 英文名稱: 22號染色體開放閱讀框15抗體 0.2ml
Anti-Menin/Men1 Menin抑癌蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml