詳細介紹
人前列腺癌細胞;LNCaP2價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 人前列腺癌細胞;LNCaP2價格
形態(tài)特性 上皮細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞由華中科技大學生命科學學院蘇莉教授提交保藏,可用于相關的基礎研究。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Synaptotagmin-4/FITC 熒光素標記突觸結合蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關基因(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
P-鈣粘附分子抗體 Anti-P-cadherin 0.1ml
SCGB3A1 英文名稱: 結合珠蛋白家族3A1抗體 0.2ml
ETV6 英文名稱: 轉錄因子ETV6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NF1(Ser2817) 磷酸化1型神經纖維瘤抗體 規(guī)格 0.1ml
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關基因(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
SOD2 (superoxide-dimutase-2) 超氧化物歧化酶2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
Anti-BNP 腦鈉素/利鈉肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Peroxiredoxin 2/PRXII 硫氧還蛋白過氧化物酶Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Collagen IV 濃縮液 0.1ml 進口分裝
TSSK6 英文名稱: 特異絲酸/蘇酸激酶6抗體 0.2ml
Phospho-CDK2 (Thr160) 英文名稱: 磷酸化周期素依賴性激酶2抗體 0.1ml
Anti-BNP 腦鈉素/利鈉肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
TSH 人血清促甲狀腺素(TSH) 96T
MDMX 英文名稱: MDM2樣P53蛋白結合抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-rabbit IgG/Cy7 Cy7標記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
HSP-70(Mouse Heat Shock Protein 70) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白70Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
ABHD1 英文名稱: 肺α/β水解酶蛋白1抗體 0.2ml
Anti-nectin 2/CD112/FITC 熒光素標記細胞黏附分子CD112抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Tn-T(Human Troponin T) ELISA Kit 人肌鈣蛋白TMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Mtp53(N235K N239Y) 突變型P53抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HSP75/TRAP1 熱休克蛋白75抗體 規(guī)格 0.2ml
anti-Q-Ab(Human anti-Q fever antibody) ELISA Kit 人抗Q熱抗體 96T
HGV Polyprotein 英文名稱: 庚型肝炎病毒多聚蛋白抗體 0.1ml
CKLFH6 英文名稱: 趨化素樣因子超家族成員6抗體 0.2ml
Anti-Mtp53(N235K N239Y) 突變型P53抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml