人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；DLD-1培養(yǎng)

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；DLD-1培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

細(xì)胞名稱  人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；DLD-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞適于做轉(zhuǎn)染宿主

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 PN5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性　

STR AMEL:X,Y；CSF1PO:11,12；D12S391:19,22；D13S317:8,11；D16S539:12,13；D18S51:11,17；D19S433:14,16；D21S11:29,32.2；D2S1338:17,
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；DLD-1培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-SATB1/FITC 熒光素標(biāo)記核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

rHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 100ug

鼠抗人β2微球蛋白抗體 Anti-β-2-MG 0.1ml

Spindlin 1 英文名稱： 卵巢癌相關(guān)蛋白抗體 0.1ml

FAK 英文名稱： 粘著斑激酶抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PDGFRA(Tyr754) 磷酸化血小板源性生長因子受體-α抗體 規(guī)格 0.1ml

rHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 100ug
SFRP1(Secreted frizzled related protein 1) 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-BAFF/CD257 TNF家族B細(xì)胞激活因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PGRN/Granulin 顆粒蛋白前體抗體 規(guī)格 0.1ml

GLUT-1 濃縮液 0.1ml 進口分裝

Urocortin 英文名稱： 尿皮質(zhì)素抗體 0.2ml

C3orf17 英文名稱： 3號染色體開放閱讀框17抗體 0.2ml

Anti-BAFF/CD257 TNF家族B細(xì)胞激活因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Tr K C 濃縮液 0.1ml 進口分裝

Ulex Europaeus Lectin 1 英文名稱： 荊豆凝集素1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-ATF2(Ser322) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格 0.1ml

NSE (neuron specific enolase) 神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DNA polymerase subunit II 英文名稱： DNA聚合酶α2抗體 0.2ml

Anti-phospho-arfaptin 2(Ser260) 磷酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor,RLR-9 ELISA Kit 人視黃酸誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-Smad1 (Ser206) 磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-rabbit IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml

AQP-3(Mouse Aquaporin 3) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白3 96T

Natriuretic Peptide Receptor A 英文名稱： 利鈉肽受體A抗體 0.2ml

bFGF 英文名稱： 堿性成纖維細(xì)胞生長因子抗體 0.1ml

Anti-Phospho-Smad1 (Ser206) 磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml