野生型人c-kit受體細胞株；A7d培養(yǎng)

野生型人c-kit受體細胞株；A7d培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細胞庫細胞株種類齊全：大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

細胞名稱  野生型人c-kit受體細胞株；A7d培養(yǎng)
形態(tài)特性 圓形　

品牌 懸浮生長　

特征特性 該細胞株由陳松森教授實驗室建立。野生c-kit基因轉(zhuǎn)染小鼠骨髓細胞FDC-P1，細胞表面表達c-kit（人干細胞因子受體）。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；IL-3

傳代方法 1：

3傳代；3~4天1次。  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR -

同工酶

染色體 　

使用權(quán)限 A類

野生型人c-kit受體細胞株；A7d培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-HSP-70/HRP 辣根過氧化物酶標記熱休克蛋白70抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

human IgM (免疫親和純化)人IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg

抗組蛋白抗體 Anti-Histone H3 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG 兔抗馬IgG 1mg

FAM78B 英文名稱： FAM78B蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-RKIP (Ser 153) 磷酸化Raf激酶抑制蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

human IgM (免疫親和純化)人IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg
SAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-p90RSK 絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh HRH1 組胺受體H1抗體 規(guī)格 0.1ml

gp210(Human Anti-glucoprotein 210) ELISA Kit 人抗核膜糖蛋白210抗體 96T

PGE2 英文名稱： 前列腺素E2抗體 0.1ml

CEP104 英文名稱： 甘酸結(jié)合蛋白抗體 0.2ml

Anti-p90RSK 絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

TMB單組份染色液 100ml/500ml 用于IHC和WB

VHR 英文名稱： 絲酸/蘇酸特定蛋白磷酸酶抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CD244(Tyr271) 磷酸化CD244抗體 規(guī)格 0.1ml

IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide 白介素-1受體拮抗劑抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DPP10 英文名稱： 二肽基肽酶10抗體 0.2ml

Anti-ADO 2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-FN /FITC 熒光素標記纖維連結(jié)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-NGFR/FITC 熒光素標記神經(jīng)生長因子受體抗體gGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BTNL8 嗜乳脂蛋白樣8抗體 規(guī)格 0.2ml

ATF3 (Activating Transcription Factor3) 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗原 0.5mg

Phospho-HDAC4 (Ser246) 英文名稱： 磷酸化組蛋白去乙?；?(Ser246)抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh RNF113B 環(huán)指蛋白113B抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-NGFR/FITC 熒光素標記神經(jīng)生長因子受體抗體gGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml