詳細介紹
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH3價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH3價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 SH3該細胞是用人間充質(zhì)干細胞免疫小鼠后取脾細胞與Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞;產(chǎn)生抗人間充質(zhì)干細胞的單克隆抗體;IgG2b型;與骨髓來源的間充質(zhì)干細胞及部分間質(zhì)來源組織起反應(yīng)。該細胞在異十八烷處理的BALB/c小鼠中可形成腹水。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%FBS
傳代方法 維持細胞濃度在0.2~1×106 cells/ml之間;2~3天換液1次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-mu Opioid receptor/FITC 熒光素標記μ-型受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-monkey IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗猴IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
癌胚抗原相關(guān)細胞粘附分子8抗體 Anti-CEAcam8/CD67 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗馬IgM 0.1ml
FAM96B 英文名稱: FAM96B蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PKN2 蛋白激酶N2抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-monkey IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗猴IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
S100A8(human S100 calcium binding protein A8/calgranulin A) ELISA Kit 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-IRAK1 (Thr387) 磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LI-cadherin 肝腸鈣粘連蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
PGF2 Alpha(Human Prostaglandin F2 Alpha) ELISA Kit 人前列腺素F2α 96T
PAPOA 英文名稱: 多聚合酶α抗體 0.2ml
C11orf74 英文名稱: 11號染色體開放閱讀框74抗體 0.2ml
Anti-Phospho-IRAK1 (Thr387) 磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
TLR-9/CD289 ELISA kit 大鼠Toll樣受體9 96T
Phospho-MAPKAPK2(Thr334) 英文名稱: 磷酸化原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh FGF19 成纖維細胞生長因子19抗體 規(guī)格 0.2ml
BNP ELISA Kit 大鼠腦鈉素/腦鈉尿肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Apoptosis enhancing nuclease 英文名稱: 細胞凋亡增強核酸酶抗體 0.2ml
Anti-ADAM-TS7/FITC 熒光素標記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-FLG/FITC 熒光素標記絲聚蛋白/中間絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-NGAL/FITC(Neutrophil Gelatinase associated Lipocalin) 熒光素標記中性粒細胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Bub1 紡錘體檢查點蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) 鈉鉀ATP酶通道蛋白抗原 0.5mg
phospho-HDAC7(Ser486) 英文名稱: 磷酸化組蛋白去乙?;?抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RNF122 環(huán)指蛋白122抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-NGAL/FITC(Neutrophil Gelatinase associated Lipocalin) 熒光素標記中性粒細胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml