詳細(xì)介紹
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL1MEA.7R.1價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL1MEA.7R.1價格
形態(tài)特性 實(shí)體瘤
品牌 體內(nèi)生長
特征特性 利用培養(yǎng)的小鼠胚胎肝上皮細(xì)胞,甲基膽蒽處理,發(fā)生了轉(zhuǎn)化。將培養(yǎng)的轉(zhuǎn)化細(xì)胞進(jìn)行BALB/C小鼠體內(nèi)移植,形成實(shí)體瘤,凍存,可用于建立小鼠肝瘤體內(nèi)移植模型。
培養(yǎng)條件 -
傳代方法 制備成細(xì)胞懸液接種至BALB/C小鼠
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 -
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-S100A13/FITC 熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A13抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide) 蛋白酶激活受體-2桔抗肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗體 Anti-MIP-1β 0.2ml
SLC2A4RG 英文名稱: 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體 0.2ml
FASTKD2 英文名稱: Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PDPK1(Ser410) 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide) 蛋白酶激活受體-2桔抗肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Ret IL-12 P40 大鼠白介素-12p40Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-E.coli O157:H7 大腸桿菌埃希氏菌O157抗體(腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh mucin3/Muc3 粘蛋白-3抗體 規(guī)格 0.2ml
F1+2(Human prothrombin fragment 1+2) ELISA kit 人凝血酶原片段F1+2 96T
SPPL2B 英文名稱: 膜內(nèi)蛋白酶4抗體 0.2ml
Chromogranin C/Sg II 英文名稱: 嗜鉻粒蛋白C抗體 0.2ml
Anti-E.coli O157:H7 大腸桿菌埃希氏菌O157抗體(腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Tie-2 ELISA Kit 大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪酸激酶2 96T
Plexin A1 英文名稱: 神經(jīng)叢蛋白A1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh INPPL1 肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
UGCG(Human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit 人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
C19orf51 英文名稱: 19號染色體開放閱讀框51抗體 0.1ml
Anti-Phospho-mTOR (Ser2448) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
LPA(Human L-phenylalanine) ELISA Kit 人苯丙氨酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Fascin1 纖維束1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Histone H3 (Di Methyl K9) 二甲基化組蛋白H3K9抗體 規(guī)格 0.1ml
BA(Human Blocking antibody) ELISA Kit 人封閉抗體 96T
PMVK 英文名稱: 磷酸甲羥戊酸激酶抗體 0.1ml
C19orf71 英文名稱: 19號染色體開放閱讀框71抗體 0.1ml
Anti-Fascin1 纖維束1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml