小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；Psi2DAP培養(yǎng)

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；Psi2DAP培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；Psi2DAP培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱  小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；Psi2DAP培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 這株細(xì)胞生成一種可以感染小鼠細(xì)胞的載體。 Psi2 DAP細(xì)胞生成的載體編碼了人類胎盤堿性磷酸酯酶基因和新霉素抗性基因。 這株細(xì)胞通過(guò)Psi2細(xì)胞插入一個(gè)重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒(DAP)基因組衍生而來(lái)。 被這種Psi2 DAP產(chǎn)生的載體感染的細(xì)胞表達(dá)的磷酸酯酶可用組織化學(xué)方法檢測(cè)，可以用作體內(nèi)追蹤他們命運(yùn)的標(biāo)記。 這些細(xì)胞也可能產(chǎn)生輔助病毒。 檢測(cè)輔助病毒的方法或其他逆轉(zhuǎn)錄病毒技術(shù)，請(qǐng)參考Cepko, C.L. Lineage analysis and immor
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-RANK/TNFRSF11A/CD265/FITC 熒光素標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗大鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

嗜鉻粒素A抗體 Anti-CGA 0.2ml

Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml

Fibulin 1 英文名稱： “衰老關(guān)鍵蛋白”抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PKC beta 1/2 蛋白激酶C beta 1/2抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗大鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
PR(Progestogerone receptor)Human 人孕激素受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Claudin 4 緊密連接蛋白4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NOC3L/FAD24 脂肪細(xì)胞分化因子24 規(guī)格 0.2ml

Human Beta Lactoglobulin, Beta-Lg ELISA Kit 人β乳球蛋白 96T

TUBA1C 英文名稱： 微管相關(guān)蛋白α6抗體 0.1ml

C1orf112 英文名稱： 1號(hào)染色體開放閱讀框112抗體 0.2ml

Anti-Claudin 4 緊密連接蛋白4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Syntenin 2 英文名稱： 多配體聚糖結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml

PHC1 英文名稱： 早期發(fā)育調(diào)控蛋白1抗體 0.2ml

增殖細(xì)胞核抗原抗體 Anti-PCNA 0.1ml

Anti-SRG5/SPATA12/FITC 熒光素標(biāo)記發(fā)生相關(guān)基因5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-NF1(Ser2515) 磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 規(guī)格 0.1ml

fgL2 (Fibrinogen-like 2) 凝血酶原酶 (又稱：纖維介素蛋白;前凝血素)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
BetaGAL(Human Alpha-galactosidase) ELISA Kit 人β半乳糖苷酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-NKA 神經(jīng)激肽A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-13Ra1 白細(xì)胞介素-13受體a1抗體 規(guī)格 0.1ml

BGP/Gehrelin(Mouse brain-gut peptides) ELISA Kit 小鼠腦腸肽 96T

phospho-PARK2(Ser101) 英文名稱： 磷酸化帕金蛋白抗體 0.1ml

Complement C3 英文名稱： 補(bǔ)體C3a過(guò)敏毒素抗體 0.1ml

Anti-NKA 神經(jīng)激肽A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml