小鼠腎腺癌細(xì)胞；RAG培養(yǎng)

小鼠腎腺癌細(xì)胞；RAG培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

細(xì)胞名稱  小鼠腎腺癌細(xì)胞；RAG培養(yǎng)
形態(tài)特性 變形蟲樣

品牌 貼壁生長

特征特性 這是一株腎臟-2α細(xì)胞株的非回復(fù)8-氮雜鳥嘌呤抗性(HPRT-, HGPRT-)克隆。 測試發(fā)現(xiàn)缺肢畸形病毒(鼠痘)陰性。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%  

傳代方法 消化3-5分鐘。1：

2。3天內(nèi)可長滿。  

傳代情況 P(264+5)

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測 陰性　

STR

同工
小鼠腎腺癌細(xì)胞；RAG培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Phospho-p63 (Ser395) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化P63抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-horse IgG/Biotin 生物素化兔抗馬IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

心肌肌鈣蛋白抗體 anti-CTn1 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

FLT3L 英文名稱： FMS樣酪酸激酶3配體抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-YAP1(Ser127) 磷酸化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/Biotin 生物素化兔抗馬IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Plant zeatin riboside,ZR ELISA Kit 植物玉米索核苷Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-DDX4/MVH/FITC 熒光素標(biāo)記DDX4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Cyclophilin D 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)40抗體 規(guī)格 0.2ml

human IgA/FITC 熒光素標(biāo)記人IgA 0.3ml

LAP3 英文名稱： 亮酸基肽酶3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh WRCH-1 WRCH1抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-DDX4/MVH/FITC 熒光素標(biāo)記DDX4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

SULT1B1 Kit Human 人 SULT1B1 ELISA配對抗體 ELISA

TXNDC11 英文名稱： 硫氧還蛋白11抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh P95/NBS1 DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體 規(guī)格 0.2ml

MSLN(mesothelin) 間皮素(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

C8orf4 英文名稱： 8號染色體開放閱讀框4抗體 0.2ml

Anti-CD36/PAS-4 CD36抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ISR- Beta ELISA Kit 大鼠胰島素受體βMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-AAK1/FITC 熒光素標(biāo)記AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FMDV Polyprotein (3D polymerase) 口蹄疫病毒 規(guī)格 0.2ml

BMPs(Mouse bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白 96T

11-Mar 英文名稱： 膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體 0.2ml

ALK 英文名稱： 間變型淋巴瘤激酶抗體 0.2ml

Anti-AAK1/FITC 熒光素標(biāo)記AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。