雜交瘤細胞；2H5B12C3培養(yǎng)

細胞名稱  雜交瘤細胞；2H5B12C3培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

品牌 半貼壁生長

特征特性 該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1：

3傳代，3-4天傳1次  

傳代情況 C2

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 未定

雜交瘤細胞；2H5B12C3培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-LCAT/FITC 熒光素標記卵磷膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-SREBP-1/FITC 熒光素標記膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh AHSG/Fetuin A/Alpha 2 HS Glycoprotein 胎球蛋白A 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml

Ghrelin 英文名稱： 腦腸肽抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Goat IgM 兔抗羊IgM 規(guī)格 1mg

Anti-SREBP-1/FITC 熒光素標記膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
NIS(Na+/I-symporter;NIS) 鈉碘轉(zhuǎn)運體蛋白(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Integrin alpha 2b/CD41 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh p70 S6 kinase alpha 磷酸化核糖體p70 S6蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

FCN1 Kit Human 人 Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 ELISA配對抗體 ELISA

TSPAN20 英文名稱： 四分子交聯(lián)體20抗體(四旋蛋白) 0.2ml

C5ORF33 英文名稱： 5號染色體開放閱讀框33抗體 0.2ml

Anti-Integrin alpha 2b/CD41 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SETBP1 英文名稱： SET結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml

ECRG4 英文名稱： 食道癌相關(guān)基因4蛋白抗體 0.1ml

血管內(nèi)皮細胞粘附分子抗體 Anti-VCAM-1/CD106 0.1ml

Anti-TRP2/FITC 熒光素標記酪氨酸酶相關(guān)蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ILK-1(Ser246) 磷酸化整合素連接激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

TGF- Beta1 (Ttansforming Growth Factor – Beta1) 轉(zhuǎn)移生長因子–β1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
IFN- Alpha(Mouse Interferon Alpha) ELISA Kit 小鼠α干擾素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CK7/FITC 熒光素標記抗細胞角蛋白7抗體(大、小鼠)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh DNMBP 動力結(jié)合蛋白DNMBP抗體 規(guī)格 0.2ml

Chicken IgG/RBITC 羅丹明標記雞IgG 0.3ml

Lactoferrin 英文名稱： 乳鐵蛋白抗體 0.1ml

伏馬菌素B1檢測試劑盒 96孔/盒 糧食作物(玉米、大米、豆類、花生、麥類等)、飼料等

Anti-CK7/FITC 熒光素標記抗細胞角蛋白7抗體(大、小鼠)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。