小鼠雜交瘤細(xì)胞株；DES1B7培養(yǎng)

小鼠雜交瘤細(xì)胞株；DES1B7培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

細(xì)胞名稱  小鼠雜交瘤細(xì)胞株；DES1B7培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

品牌 懸浮生長

特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代，3-4天傳1次  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 未定
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；DES1B7培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-KLF8/FITC 熒光素標(biāo)記KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-SLC34A2/NaPi-2b/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh alpha Actinin 4 α-輔肌動蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml

Rabbit Anti-human IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml

GMFG 英文名稱： 膠漿成熟因子γ/GMF-γ抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-SLC34A2/NaPi-2b/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Mouse c-jun ELISA Kit 小鼠c-junMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-phospho-B-Raf (Ser601) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化B-Raf抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh EphA7/Eph receptor A7 酪氨酸蛋白激酶受體A7抗體 規(guī)格 0.2ml

F1+2 (Rabbit prothrombin fragment 1+2) ELISA Kit 兔凝血酶原片段F1+2 96T

MPV17 英文名稱： T淋巴細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

ANKS1A 英文名稱： 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體 0.2ml

Anti-phospho-B-Raf (Ser601) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化B-Raf抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

SAP(Human Serum amyloid P) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白P 96T

SPDEF 英文名稱： 上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh MTTP 微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 規(guī)格 0.2ml

Ret IgM ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白MMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

CARD6 英文名稱： 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 0.2ml

Anti-phospho-Ephrin B (Tyr324/329) 磷酸化Ephrin B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-GPR14/FITC 熒光素標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-P38 MAPK/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh beta-Amyloid(35-42) β淀粉樣肽/Aβ42抗體 規(guī)格 0.1ml

C-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽) 0.5mg

HP1 gamma 英文名稱： 異染色質(zhì)蛋白1-γ抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rarres3/TIG3 視黃酸受體應(yīng)答蛋白3抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-P38 MAPK/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。