小鼠小腸平滑肌細胞；MUS-M1培養(yǎng)

細胞名稱  小鼠小腸平滑肌細胞；MUS-M1培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞系來源于一雄性小鼠的小腸組織，2009年由中科院昆明細胞庫建立。

培養(yǎng)條件 M-199：

with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 10%FBS  

傳代方法 1：

2傳代；3-4天一次  

傳代情況 P3

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 熒光法（-）　

STR -

同工酶

染色體

使用權限 A類
小鼠小腸平滑肌細胞；MUS-M1培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據經驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線
Anti-Phospho-MARCKS (Ser152/156) /FITC 熒光素標記磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-TFPI-2/FITC 熒光素標記組織因子途徑抑制劑-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ADAM23 去整合素樣金屬蛋白酶23抗體 規(guī)格 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗雞IgG 0.1ml

GPR135 英文名稱： G蛋白偶聯受體GPR135蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Bovine IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-TFPI-2/FITC 熒光素標記組織因子途徑抑制劑-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MHB(Human Methemoglobin) ELISA Kit 人高鐵血紅蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-PTTG 垂體轉化基因抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh HAUS4/C14orf94 14號染色體開放閱讀框94抗體 規(guī)格 0.2ml

Cyclin-D2 ELISA Kit 大鼠細胞周期素D2 96T

PSGD/HOXB13 英文名稱： 同源盒蛋白HOXB13抗體 0.2ml

phospho-Bik(Thr33) 英文名稱： 磷酸化促凋亡Bik蛋白抗體 0.1ml

Anti-PTTG 垂體轉化基因抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rat secretory IgA 英文名稱： 分泌型免疫球蛋白A抗體 0.2ml

EAAT4 英文名稱： 膠質細胞谷酸運載蛋白4抗體 0.2ml

臂板蛋白4C抗體 Anti-Sema4C 0.2ml

Anti-TBX2/T-box2/FITC 熒光素標記新型抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MEF2A(Thr319) 磷酸化肌細胞增強因子2抗體 規(guī)格 0.1ml

AQP9(aquaporin Protein-9) 水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit 人發(fā)動蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-SP-B 肺表面活性蛋白B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-Mouse IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

Cyt-C ELISA Kit 大鼠細胞色素C 96T

NIT2 英文名稱： NIT2蛋白抗體 0.2ml

BACE2 英文名稱： β淀粉樣前體蛋白裂解酶2抗體 0.2ml

Anti-SP-B 肺表面活性蛋白B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。