抗人環(huán)孢菌素A-1雜交瘤細胞；CyPA-1培養(yǎng)

抗人環(huán)孢菌素A-1雜交瘤細胞；CyPA-1培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應用公司細胞庫細胞株種類齊全：大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術指導。歡迎廣大科研用戶！

細胞名稱  抗人環(huán)孢菌素A-1雜交瘤細胞；CyPA-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

品牌 半貼壁生長

特征特性 產生單克隆抗體為IgG1型；FCM(+),WB(+),ELISA(+),ICH(+)。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C28

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR

同工酶

染色體

使用權限 A類

抗人環(huán)孢菌素A-1雜交瘤細胞；CyPA-1培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據經驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-Phospho-LKB1 (Thr189) /FITC 熒光素標記磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Synapsin I /FITC 熒光素標記神經突觸素1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ADM2 中介素抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗羊IgG 0.1ml

GPR17 英文名稱： G蛋白偶聯受體17抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-chicken IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗雞IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-Synapsin I /FITC 熒光素標記神經突觸素1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Melamine/OVA(ovalbumin) 三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯物Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg

Anti-CDK7 周期素依賴性激酶7抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh OGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase 8-羥基鳥嘌呤DNA糖基化酶 規(guī)格 0.1ml

Protein G Sepharose 4 Fast Flow 重組蛋白G親和層析柱 2ml柱床體積

TIMP-1(CT) 英文名稱： 金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(C端) 0.1ml

Collagen IV 英文名稱： IV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體 0.1ml

Anti-CDK7 周期素依賴性激酶7抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rat IgG/Cy5.5 熒光素Cy5.5標記大鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml

ox-LDL 英文名稱： 氧化低密度脂蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh CYP5A1/Thromboxane synthase 血栓素合成酶抗體 規(guī)格 0.2ml

BGP(Osteocalcin/Bone Gla-protein)ELISA Kit 兔骨鈣素 ELISA試劑盒Multi-class antibodies規(guī)格： 96T

Rhesus antibody Rh ZBTB2 鋅指蛋白437抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-DAPK1/FITC 熒光素標記凋亡相關蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TIMP-4 ELISA Kit 大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Annexin I/FITC 熒光素標記人、大、小鼠膜粘連蛋白 I抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FANK1 HSD13蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

D2R ELISA Kit 大鼠多巴胺D2受體 96T

Monoacylglycerol Lipase 英文名稱： 單酰甘油脂肪酶抗體 0.2ml

phospho-APC1 (Ser355) 英文名稱： 磷酸化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體 0.1ml

Anti-Annexin I/FITC 熒光素標記人、大、小鼠膜粘連蛋白 I抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml