人滑膜細胞試劑盒

產(chǎn)品名稱：人滑膜細胞試劑盒
規(guī)格：6次/盒操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-Mfn1/FITC 熒光素標記線粒體融合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-TNFAIP1/FITC 熒光素標記壞死因子α誘導蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ACE1/CD143 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶ACE1抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-Biotin/PE PE標記的兔抗生物素抗體IgG 0.1ml

GPR58 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體58抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Avidin/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗親和素 規(guī)格 0.1ml

Anti-TNFAIP1/FITC 熒光素標記壞死因子α誘導蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MCP-1/CCL2/MCAF ELISA KIT 大鼠單核細胞趨化蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-ADK/adenylate kinase/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠腺苷酸激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FBXL20 FBXL20蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

LTE4 ELISA Kit 大鼠白三烯E4 96T

Phospho-MARCKS(Ser170) 英文名稱： 磷酸化丙酸蛋白激酶C底物Marcks抗體 0.1ml

ARTS 英文名稱： 凋亡相關蛋白TGFb信號抗體 0.2ml

Anti-ADK/adenylate kinase/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠腺苷酸激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit IgG/Cy3 熒光素Cy3標記兔IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml

LRFN3 英文名稱： 神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh DDX58 DDX58抗體 規(guī)格 0.2ml

BGP/Gehrelin(Mouse brain-gut peptides) ELISA Kit 小鼠腦腸肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

土霉素單克隆抗體 小鼠單抗 0.1

Anti-CSP/FITC 熒光素標記環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人滑膜細胞試劑盒PS(Human Prednisolone) ELISA Kit 人潑尼松龍Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-M2-PK (pyruvate Kinase M2) 丙酮酸激酶-M2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh KIF15 驅(qū)動蛋白家族成員15抗體 規(guī)格 0.2ml

DHEA-S ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮酯 96T

PRSS3 英文名稱： 腦胰蛋白酶3抗體 0.2ml

phospho-CDKN2A (Ser152) 英文名稱： 磷酸化抑癌基因p16抗體 0.1ml

Anti-M2-PK (pyruvate Kinase M2) 丙酮酸激酶-M2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml