人椎間盤髓核細(xì)胞組織處理緩沖液

人椎間盤髓核細(xì)胞組織處理緩沖液只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

人椎間盤髓核細(xì)胞組織處理緩沖液懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
產(chǎn)品名稱：人椎間盤髓核細(xì)胞組織處理緩沖液
規(guī)格：100ml

貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-Leptin/FITC 熒光素標(biāo)記瘦素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-SSTR2 /FITC 熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)抑素受體2(SSTR2)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh AGFG1 艾滋病病毒復(fù)制結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml

GPR70 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體70抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗羊IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-SSTR2 /FITC 熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)抑素受體2(SSTR2)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MC-1R (melanocortin-1-receptor) 黑皮質(zhì)素-1受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml

Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser108) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-B-Raf (Ser446) 磷酸化B-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

去離子水 100ml

VAMP1 英文名稱： VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體 0.1ml

DUOXA1 英文名稱： 雙氧化酶成熟因子抗體 0.2ml

Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser108) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照) 0.1ml

LRRC4 英文名稱： 腦瘤相關(guān)基因抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh CYP2D6 細(xì)胞色素P450 2D6抗體 規(guī)格 0.1ml

IL-1 Alpha ELISA kit 魚類白介素1αMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Rhesus antibody Rh XKR1 膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白XK抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-DCIR/CLEC4A/FITC 熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
DNase- I (Human deoxyribonuclease I ) ELISA Kit 人脫氧核糖核酸酶ⅠMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-GluR1/NMDAR1 谷氨酸受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh IGSF1 抑制素結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

DHT ELISA Kit 大鼠雙氫睪酮 96T

Perforin 英文名稱： 穿孔素抗體 0.1ml

Cecropin 英文名稱： 抗菌肽/天蠶素抗體 0.2ml

Anti-GluR1/NMDAR1 谷氨酸受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml