人骨髓單核細胞試劑盒

產品名稱：人骨髓單核細胞試劑盒
規(guī)格：6次/盒
}貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據經驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線
Anti-MAGE-A4/FITC 熒光素標記黑色素瘤相關抗原4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-TERT/FITC 熒光素標記端粒酶逆轉錄酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ADAMTS15 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶15型抗體 規(guī)格 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗雞IgM 0.1ml

GPX4 英文名稱： 谷胱甘肽過氧化酶4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Bovine IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-TERT/FITC 熒光素標記端粒酶逆轉錄酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相關糖蛋白a/b(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CD31/PECAM-1 血小板內皮細胞黏附分子-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PAFAH1B3/PAFAHG 血小板衍化生長因子γ抗體 規(guī)格 0.2ml

AXL Kit Mouse 小鼠 Axl Kinase ELISA配對抗體 ELISA

TET2 英文名稱： 甲基雙加氧酶TET2抗體 0.2ml

C20ORF141 英文名稱： 20號染色體開放閱讀框141抗體 0.2ml

Anti-CD31/PECAM-1 血小板內皮細胞黏附分子-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml

GIMAP8 英文名稱： GTP酶IMAP家族成員8抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Apelin receptor/AGTRL1 血管緊縮素樣蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-IL-17R/IL-17RA/CD217/FITC 熒光素標記白介素17受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-Rad17/FITC 熒光素標記細胞周期檢控Rad17蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MUC5B(Human mucin-5 subtype B) ELISA kit 人粘蛋白/粘液素5BMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-ACY 3/HCV-HCBP1 丙型肝炎病毒核結合蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MIIP IGFBP2結合蛋白/遷移和侵潤抑制蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

DNase- I (Human deoxyribonuclease I ) ELISA Kit 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ 96T

RNF130 英文名稱： 環(huán)指蛋白130抗體 0.2ml

人骨髓單核細胞試劑盒CGGBP1 英文名稱： CGG結合蛋白1抗體 0.1ml

Anti-ACY 3/HCV-HCBP1 丙型肝炎病毒核結合蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。