非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2培養(yǎng)

非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細胞庫細胞株種類齊全：大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

細胞名稱  非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣細胞

品牌 貼壁生長

特征特性 Vero-HCV-E2細胞整合有丙型肝炎病毒的E2基因，能穩(wěn)定表達E2蛋白，是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點實驗室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C40

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-FOXO4/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-NKG2D/CD314 /FITC 熒光素標(biāo)記NK細胞受體/自然殺傷細胞活化性受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BTBD17 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 規(guī)格 0.2ml

ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原 0.5mg

HE4 英文名稱： 附睪分泌蛋白4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh RIT1 RIT1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-NKG2D/CD314 /FITC 熒光素標(biāo)記NK細胞受體/自然殺傷細胞活化性受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
INH-A(Mouse Inhibin) ELISA Kit 小鼠抑制素AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CD170/Siglec-5/FITC 熒光素標(biāo)記唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/APC APC標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml

PV ELISA Kit 魚卵黃高磷蛋白 96T

MeCP2 英文名稱： 甲基化CpG結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml

ARHGAP20 英文名稱： Rho GTP酶激活蛋白20抗體 0.2ml

Anti-CD170/Siglec-5/FITC 熒光素標(biāo)記唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-human k-chain 兔抗人k-鏈 1mg

Laminin 2 alpha 英文名稱： 層粘蛋白α2抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh DOK3 對接蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml

AECA(Mouse anti-endothelial cell antibody) ELISA Kit 小鼠抗內(nèi)皮細胞抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

phospho-alpha B Crystallin (Ser59) 英文名稱： 磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體 0.1ml

Anti-Phospho-c-Fos (Ser32) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化c-fos抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MT ELISA Kit 大鼠金屬硫蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-MAP1A 微管相關(guān)蛋白1A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗雞IgG 規(guī)格 0.1ml

EK(Human epidermal keratin) ELISA Kit 人表皮角蛋白 96T

Nestin 英文名稱： 巢蛋白/神經(jīng)上皮干細胞蛋白抗體 0.1ml

BRCA1 英文名稱： 癌易感基因1抗體 0.1ml

Anti-MAP1A 微管相關(guān)蛋白1A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。