SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-1培養(yǎng)

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-1培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

細(xì)胞名稱  SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞源自CV-1細(xì)胞株，經(jīng)轉(zhuǎn)染編碼野生型T抗原、起始點(diǎn)缺陷突變的SV40得到；細(xì)胞中整合有SV40基因組完整早期區(qū)段的單個(gè)拷貝。該細(xì)胞表達(dá)T抗原，適用于需要SV40T抗原表達(dá)的載體的轉(zhuǎn)染；保留SV40溶細(xì)胞性生長的特性；支持40℃時(shí)溫度敏感性A209病毒的復(fù)制；支持早期區(qū)段缺失的SV40純體的復(fù)制。因含有SV40的DNA序列，該細(xì)胞需要在2級生物安全柜中操作。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-1培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-E-Selectin/FITC 熒光素標(biāo)記E選擇素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Myf6/FITC 熒光素標(biāo)記生肌調(diào)節(jié)因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C19orf24 19號染色體開放閱讀框24抗體 規(guī)格 0.2ml

Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 細(xì)胞激酶信號-1抑制劑(抗原) 0.5mg

HEATR5B 英文名稱： HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5B蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh RPA70 單鏈結(jié)合蛋白70抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Myf6/FITC 熒光素標(biāo)記生肌調(diào)節(jié)因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ILK-1(mouse) 小鼠整合素連接激酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106) 磷酸化雌激素受體α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MSK1/RPS6KA5 有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.2ml

HG(Human Herpes Gestation) ELISA Kit 人皰疹抗體 96T

phospho-SYT6 (Thr418) 英文名稱： 磷酸化突觸蛋白6抗體 0.1ml

CK16 英文名稱： 細(xì)胞角蛋白16抗體 0.1ml

Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106) 磷酸化雌激素受體α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rabbit Anti-human IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml

GM2A 英文名稱： 神經(jīng)鞘脂激活蛋白3抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ALOXE3 表皮型脂氧合酶3抗體(魚鱗病相關(guān)蛋白) 規(guī)格 0.2ml

Anti-KLK3/FITC 熒光素標(biāo)記激肽釋放酶3/舒血管素3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-SLK/Fyn/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸蛋白激酶Fyn(同步原癌基因)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Cyclin H/FITC 熒光素標(biāo)記周期素H抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-LILRB3/CD85a/PirB/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Caspase 4/Caspase 11 半胱胺酸蛋白酶4/11抗體 規(guī)格 0.2ml

ELK1 細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗原 0.5mg

HCCS 英文名稱： 全細(xì)胞色素C合成酶抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Sin3b 轉(zhuǎn)錄抑制蛋白Sin3b抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-LILRB3/CD85a/PirB/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml