草魚腎細胞；GIK培養(yǎng)

細胞名稱  草魚腎細胞；GIK培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 GIK細胞是長江水產所建立鑒定的多株草魚腎細胞之一，貼壁生長，常用于魚類疫病研究，尤其是病毒研究。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS　

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR STR鑒定

同工酶

染色體

使用權限 A類

草魚腎細胞；GIK培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據經驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-cRaf/Raf1(c-raf 1) /FITC 熒光素標記抗cRaf/Raf1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-KT3 tag/HRP 辣根過氧化物酶標記KT3 tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CCDC157 卷曲螺旋結構域蛋白157抗體 規(guī)格 0.2ml

GRM2/GLUR2 (Glutamate Receptor Metabotropic 2) 促代謝型谷酸受體2抗原 0.5mg

HECW1 英文名稱： 肌側索硬化癥相關蛋白HECW1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Smad3 細胞信號轉導分子SMAD3抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-KT3 tag/HRP 辣根過氧化物酶標記KT3 tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IL-6R Alpha (IL6R-alpha) 白細胞介素6受體α抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Adducin protein 內收蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-cdc25C (Ser216) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25C抗體 規(guī)格 0.1ml

非水溶性封 10ml 使用后組織收縮較明顯

WBP2 英文名稱： WBP2蛋白抗體 0.2ml

DDX23 英文名稱： 三磷酸腺苷依賴解旋酶DDX23抗體 0.2ml

Anti-Adducin protein 內收蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/Streptavidin 鏈霉親和素標記兔抗人IgG 0.1ml

LR8 英文名稱： 跨膜蛋白TMEM176B抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh DIS3L2 有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體 規(guī)格 0.2ml

CG(Mouse Chorionic Gonadotrophin)ELISA Kit 小鼠絨毛膜促性腺激素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

慶大霉素檢測試劑盒 96孔/盒 動物組織/水產/蜂蜜/奶

Anti-Clostridium perfringens type D/FITC 熒光素標記兔抗D型產氣莢膜梭菌抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
sPL-A2(Human soluble Phospholipase A2) ELISA Kit 人可溶性磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-NQO1 醌氧化還原酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IGSF10 免疫球蛋白超家族成員10抗體 規(guī)格 0.2ml

ENA-Ab(Human anti-extractable nuclear antigen antibody) ELISA Kit 人抗可提取核抗原抗體 96T

PALM3 英文名稱： PALM3抗體 0.1ml

Camk1g 英文名稱： 鈣/鈣調蛋白依賴蛋白激酶IG抗體 0.1ml

Anti-NQO1 醌氧化還原酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml