詳細(xì)介紹
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Klebsiella aerogenesPCR |
規(guī)格 | 50次 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
相關(guān)產(chǎn)品:
異源曼氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
折光馬爾太蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
馬爾太蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
牛捻轉(zhuǎn)胃蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
梅克爾多元癌細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
注意事項:
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
白介su4受體檢測試劑盒 IL4R ELISA KitIerleukin 4 Receptor(IL4R)ELISA Kit
白介su3受體α檢測試劑盒 IL3Rα ELISA KitIerleukin 3 Receptor Alpha(IL3Ra)ELISA Kit
白介su22受體檢測試劑盒 IL2R ELISA KitIerleukin 22 Receptor(IL22R)ELISA Kit
白介su21受體檢測試劑盒 IL21R ELISA KitIerleukin 21 Receptor(IL21R)ELISA Kit
白介su1受體關(guān)聯(lián)激mei3檢測試劑盒 IRAK3 ELISA KitIerleukin 1 Receptor Associated Kinase 3(IRAK3)ELISA Kit
白介su1受體關(guān)聯(lián)激mei1檢測試劑盒 IRAK1 ELISA KitIerleukin 1 Receptor Associated Kinase 1(IRAK1)ELISA Kit
白介su1受體輔助蛋白樣蛋白2檢測試劑盒 IL1RAPL2 ELISA KitIerleukin 1 Receptor Accessory Protein Like Protein 2(IL1RAPL2)ELISA Kit
白介su1θ檢測試劑盒 IL1θ ELISA KitIerleukin 1 Theta(IL1F10)ELISA Kit
白介su1η檢測試劑盒 IL1η ELISA KitIerleukin 1 Eta(IL1h)ELISA Kit
白介su1ζ檢測試劑盒 IL1ζ ELISA KitIerleukin 1 Zeta(IL1z)ELISA Kit
產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR檢測試劑盒組織金屬蛋白mei抑制因子1(TIMP1)ELISA試劑盒Rabbit Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1(TIMP1)ELISA Kit
組織蛋白meiK(CTSK)ELISA試劑盒Rabbit Cathepsin K(CTSK)ELISA Kit
組蛋白H3(H3)ELISA試劑盒Rabbit Histone H3(H3)ELISA Kit
轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)ELISA試劑盒Rabbit Transforming Growth Factor Beta Induced Protein(TGFbI)ELISA Kit