詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.2PCR管 | YS-01P6527 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
液體石蠟 重質(zhì)、密度:0.86-0.89氨水 for HPLC,≥25% in H2O人抗Smith抗體(Sm)免疫試劑盒
啉 AR,99%氨水 ACS, 28.0-30.0% NH3 in water人抗Scl-70抗體免疫試劑盒
1,3,5- CP,97%氨水 ≥28% NH3 in H2O,電子級人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)免疫試劑盒
1,2,4,5-四 98%異 電子級人抗Sa抗體(anti-Sa-Ab)免疫試劑盒
1,2,4,5-四 95%鄰氨基 98%人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)免疫試劑盒
1,2,4,5-四 NMR定量標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC)鄰氨基 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%人抗M2能受體抗體免疫試劑盒
1,2,3- 91%鄰氨基 99%人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)免疫試劑盒
1,2,3- 分析標(biāo)準(zhǔn)品3-氨基吡啶 99%人抗IVIgG抗體免疫試劑盒
1,2,4- 98%2-氨基-4- 97%人抗IL6自身抗體免疫試劑盒
1,2,4-標(biāo)準(zhǔn)溶液 1mg/ml ,用于水質(zhì)分析2'-氨基乙酮 97%人抗IgE受體抗體免疫試劑盒
1,2,4- 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-氨基-4-酚 98%人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)免疫試劑盒
1,2,4- Standard for GC,≥99.5% (GC)5-氨基吲哚 97%人抗G2s抗體(IgG)免疫試劑盒
N-芐基異 97.0%3-氨基, 包含0.1%碳穩(wěn)定劑, 98%人抗EB病抗體(EBV)免疫試劑盒
巴豆 98%鄰氨基對叔丁基酚 98%人抗E3泛蛋白連接TRIM21(TRIM21)抗體免疫試劑盒
巴豆 Standard for GC,≥99.9% (GC)鄰硝基對叔丁基 98%人抗DNAB抗體(anti-DNase B Ab)免疫試劑盒
哈維氏弧菌核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒,2--5-溴嘧啶色P450Ⅱj3抗體
大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒,2--5-溴嘧啶鈣激活離子通道4抗體
大鼠磷脂A2(PL-A2)ELISA試劑盒,2--5-溴嘧啶周期依賴性激6抗體
大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)ELISA試劑盒,四對二周期依賴性激7抗體
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒,四對二周期依賴性激8抗體
凋亡蛋白激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒--動物,人四對二周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體
60%/L蛋白胨肉湯 用于副溶血性弧菌的前增菌培養(yǎng)2-氨基-3-(三甲基)吡啶Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體
L-谷氨單鈉鹽2-氨基-3-(三甲基)吡啶c-fos抗體
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
二、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。