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詳細(xì)介紹
人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱(chēng) | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗體 | 活化T細(xì)胞核因子5蛋白抗體 |
間隙連接蛋白37抗體 | 促上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體 |
β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體 | 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(人膀胱癌細(xì)胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304] |
載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體 | 卷曲蛋白FZD7抗體 |
酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體 | CP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體 |
ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 胚肺細(xì)胞,HLF細(xì)胞 Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人肝癌細(xì)胞) | G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白2抗體 | CL-0026ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
抗體 | 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14 |
胰島素原抗體 | marc-145-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)猴胚胎腎上皮細(xì)胞 Marc-145-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin |
抑制素βC抗體 | Caki-2 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞 Caki-2 human renal clear cell carcinoma cells McCoy's 5A Media (Modified with icine) 10%FBS |
尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體 | CV-1(M)細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 人正常前列腺上皮細(xì)胞,RWPE-1細(xì)胞 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C |
J82(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 LncaP, 人前列腺癌細(xì)胞 人腦瘤細(xì)胞;SF763 | 人原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基M14(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人肝臟星形細(xì)胞裂解物HHSteCL | HPlEpC Pellet 人胎盤(pán)上皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟cDNAHPA-v cDNA |
SELL Others Mouse 小鼠 SELL / CD62L / L-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
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