詳細(xì)介紹
豚鼠白三烯B4(LTB4)酶聯(lián)免疫試劑盒ELISA的操作要點(diǎn)?
優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條
件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。
本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELSIA,國(guó)外試
劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,兩者均有詳細(xì)的使用說明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出
準(zhǔn)確的結(jié)果。
規(guī)格 | 英文名稱 | 試劑名稱 |
48T/96T | Guinea pig leukotriene B4 (LTB4) ELISA Kit | 豚鼠白三烯B4(LTB4)酶聯(lián)免疫試劑盒 |
豚鼠白三烯B4(LTB4)酶聯(lián)免疫試劑盒⑴標(biāo)本的采取和保存
可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物
(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假
陽(yáng)性反應(yīng)。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑。
⑵ 試劑的準(zhǔn)備
按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包
括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出
的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰
箱保存。
⑶加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物
加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。
⑷保溫
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi)。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn),一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。
⑸洗滌
可分為浸泡式和流水沖洗式兩種洗滌方式。
⑹顯色和比色
?顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)
的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。
?比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比
色架中。以軟板為載體的試驗(yàn),需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。
?酶標(biāo)比色儀
簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀,通常指于測(cè)讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對(duì)固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。
⑺結(jié)果判斷
①定性測(cè)定
a.間接法和夾心法
陽(yáng)性判定值;標(biāo)本/陰性對(duì)照比值。
b. 競(jìng)爭(zhēng)法
陽(yáng)性判定值法;抑制率法。
②定量測(cè)定
2,6-二氯甲苯 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 118-69-4
2-甲基-3-羥基-4-吡喃酮 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 118-71-8
2,6-二甲基巰基苯酚 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 118-72-9
3-苯基-L-脯氨酸 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 118758-48-8
5-氯-2-硝基三氟甲苯 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 118-83-2
2-氯苯甲酸 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 118-91-2
4-氯-3,5-二硝基苯甲酸 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 118-97-8
二異丁基氫化鋁 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 1191-15-7
DDTT 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 1192027-04-5
二氯-1,2-二硫環(huán)戊烯酮 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 1192-52-5
N-甲基-2-吡咯甲醛 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 1192-58-1
3-甲基-2-環(huán)己烯-1-酮 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS:
鹽酸達(dá)波西汀 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 119356-77-3
2-吡咯甲酸甲酯 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 1193-62-0
3-奎寧環(huán)酮鹽酸鹽 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 1193-65-3
3-[5-(二甲基氨基甲?;?哌啶-3-基]硫]-6-(1-羥乙基)-4-甲基-7-氧代-1-氮雜二環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 119478-56-7
2-羥基喹喔啉 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 1196-57-2
5-吲哚甲醛 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 1196-69-6
氨甲環(huán)酸 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) CAS: 1197-18-8
CIN-1瓊脂平板(9cm) 10個(gè)/包 用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌
CIN-1 Agar
改良Skirrow氏瓊脂平板(9cm) 10個(gè)/包 用于彎曲桿菌的分離培養(yǎng)
Modified Skirrow Agar
甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂平板(9cm) 10個(gè)/包 用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計(jì)數(shù)
Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base
BCYE-CYS瓊脂平板(9cm) 10個(gè)/包 用于軍團(tuán)菌的選擇性分離培養(yǎng)
BCYE-CYS Agar
改良CCDA瓊脂平板(9cm) 10個(gè)/包 用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)
Modified CCDA Agar
Amies運(yùn)送培養(yǎng)基管 20支/包 用于致病菌標(biāo)本的運(yùn)送保存
Amies Transport Medium
Stuart運(yùn)送培養(yǎng)基管 20支/包 用于致病菌標(biāo)本的運(yùn)送保存
Stuart Transport Medium
Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基管 20支/包 用于運(yùn)送腸道致病菌標(biāo)本
Cary-Blair Transport Medium
豚鼠白三烯B4(LTB4)酶聯(lián)免疫試劑盒無(wú)菌病毒運(yùn)輸液(VTM) 3ml/支*36 用于甲流病毒標(biāo)本運(yùn)送
VTM Broth
基因工程大腸桿菌培養(yǎng)基