肉桂酸4羥化酶（C4H）微量法

需自配儀器：

1、酶標(biāo)儀（比色測(cè)定波長為450nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、微量移液器

基本信息：

產(chǎn)品名稱：肉桂酸4羥化酶（C4H）微量法

測(cè)試方法:微量法

規(guī)格 :100管/96樣

貨號(hào)：YS-01S7034

測(cè)定意義

C4H又稱反式肉桂酸-4-單氧化酶，多存在于高等植物、酵母、菌類中，該酶催化肉桂酸羥化作用產(chǎn)生4-香豆酸鹽，是苯丙烷途徑中繼L-苯丙氨酸解氨酶之后的第二個(gè)關(guān)鍵酶。

測(cè)定原理：

C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸鹽和NADPH，在340nm下測(cè)定NADPH生成速率，即可反映C4H活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
用途范圍：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。

下列是公司正在銷售的產(chǎn)品：
兔多效生長因子(PTN)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒PorifericolaStat Antibody Sampler Kit

兔延伸蛋白A(EloA)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 黑曲霉Akt Isoform Antibody Sampler Kit

兔組織轉(zhuǎn)谷酰(TGM2)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒美澳型核果褐腐病Pro-Survival Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit

兔表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黃單胞Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit

兔Smad同源物4 (Smad4/MADH4)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 蠟狀芽孢桿AICAR

兔表皮生長因子受體2(EGFR2)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒大腸埃希Jak Isoform Sampler Kit

兔骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒糙皮側(cè)耳Forkhead Signaling Antibody Sampler Kit

兔肽酰脯酰異構(gòu)/親環(huán)樣蛋白1(PPIL1)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黑曲霉DNA Damage Antibody Sampler Kit

兔骨成型蛋白4 (BMP-4)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 松球殼孢Trichostatin A (TSA)

兔白三烯E4(LTE4)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 黑根霉Wortmannin

兔血管內(nèi)皮抑抗體(ES-Ab)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  盤長孢狀盤孢Staurosporine

兔B分化因子(BCDF)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  香蕉生假絲酵母4E-BP Antibody Sampler Kit

兔生長抑(SST)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒果生鏈核盤ER Stress Antibody Sampler Kit

兔腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒長谷川赤擔(dān)孢酵母CREB (48H2) Rabbit mAb (HRP Conjugate)

兔XII B組磷脂A2(PLA2G12B)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒地錘屬AMPK and ACC Antibody Sampler Kit
肉桂酸4羥化酶（C4H）微量法GDP甘露糖焦磷化抗體Human WDR46 ELISA Kit硅鈣

G蛋白偶聯(lián)受體171抗體Human WDR18 ELISA Kit檸檬鋰

神經(jīng)膜糖蛋白M6bHuman WDR55 ELISA Kit金絲桃苷

鳥苷激GMK抗體Human WARS2 ELISA Kit荷葉

半乳糖腦苷脂抗體Human WDR16 ELISA Kit大戟二烯醇

G蛋白偶聯(lián)受體激5抗體Human WBP1 ELISA Kit穿山甲

GTP結(jié)合蛋白R(shí)EM1抗體Human WBP11 ELISA Kit松葉

磷化糖原合激-3α抗體Human WASL ELISA Kit沉香
選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。