亞鐵氧化酶（HP）微量法

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

基本信息：

產(chǎn)品名稱：亞鐵氧化酶（HP）微量法

測(cè)試方法:微量法

規(guī)格 : 100管/96樣

貨號(hào)：YS-01S7036

測(cè)定意義

Hephaestin (HP)作為銅藍(lán)蛋白的同系物,是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白亞鐵氧化酶，HP屬亞鐵氧化酶家族成員,具有亞鐵氧化酶的活性,參與體內(nèi)鐵代謝。HP的表達(dá)可受鐵、銅及鋅等金屬離子的調(diào)節(jié)。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+，在介導(dǎo)鐵的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)中有重要作用。

測(cè)定原理：

HP催化Fe2+氧化為Fe3+，F(xiàn)e2+和ferrozine反應(yīng)顯色，在560 nm下有特征吸光值。通過(guò)測(cè)定Fe2+的減少速率可測(cè)得亞鐵氧化酶的活性。

自備用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
用途范圍：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

需自配儀器：

1、酶標(biāo)儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為450nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、微量移液器

下列是公司正在銷售的產(chǎn)品：

兔生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒環(huán)狀芽胞桿Brefeldin A

兔不均一核糖核蛋白U (HNRPU)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒耐寒短桿Cyclosporin A

兔骨成型蛋白受體II(BMPR2)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 釀酒酵母FK-506

兔原鈣黏β2(PCDHβ2)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 紅根須腹Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb (PE Conjugate)

兔載脂蛋白C2(ApoC2)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 毛頭鬼傘（雞腿菇）Presenilin 2 (D30G3) Rabbit mAb

兔神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒沙漠畢赤酵母Presenilin 2 (D30G3) Rabbit mAb

兔粘蛋白4(MUC4)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒草假單胞Atg5 (D5G3) Rabbit mAb

兔鐵調(diào)(Hepc)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒扶桑本森頓酵母CD14 (61D3) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjugate)

兔凝血因子XIII B多肽(F13B)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  串珠鐮孢CD45 (30-F11) Rat mAb (redFluor™ 710 Conjugate)

兔肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 鞘脂屬Phospho-Stat6 (Tyr641) (D8S9Y) Rabbit mAb (PE Conjugate)

兔甘酰tRNA合成(GARS)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  植物乳桿LysRS (D16D1) Rabbit mAb

兔視黃結(jié)合蛋白4(RBP4)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒慢生根瘤His-Tag (27E8) Mouse mAb (HRP Conjugate)

兔大腦脂肪結(jié)合蛋白7(FABP7)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒裂褶PTMScan® IAP Buffer (10X)

兔窖蛋白(Cav-1)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 假蜜環(huán)（蜜環(huán)、小蜜環(huán)、榛蘑）CD3ε (D4V8L) Rabbit mAb

兔CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白γ(C/EBPγ)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 羅輪隱球酵母CD3ε (D4V8L) Rabbit mAb
亞鐵氧化酶（HP）微量法β半乳糖苷1樣蛋白3抗體Human VTA1 ELISA Kit美洛昔康（HPLC法）

糖皮質(zhì)誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體Human VPS24 ELISA Kit丁二洛沙平（琥珀洛沙平）

腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體Human VPS18 ELISA Kit谷酰

神經(jīng)節(jié)苷脂誘導(dǎo)分化相關(guān)蛋白1抗體Human VPS28 ELISA Kit可

G蛋白偶聯(lián)受體18抗體Human VPS28 ELISA Kit皂角LAMP鑒定試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體119抗體Human VPS33A ELISA Kit人靶向核糖核(TR)Elisa測(cè)定試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體88抗體Human VN1R4 ELISA Kit人脫氧尿三磷(DUTP)Elisa測(cè)定試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體125抗體Human VMO1 ELISA Kit小鼠血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)Elisa測(cè)定試劑盒