詳細(xì)介紹
人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)酶聯(lián)免疫試劑盒ELISA的操作要點(diǎn)?
優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條
件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。
本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試
劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,兩者均有詳細(xì)的使用說明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出
準(zhǔn)確的結(jié)果。
規(guī)格 | 英文名稱 | 試劑名稱 |
48T/96T | Human STAT3 Protein Inhibitory molecule (PIAS3) ELISA Kit | 人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)酶聯(lián)免疫試劑盒 |
人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)酶聯(lián)免疫試劑盒⑴標(biāo)本的采取和保存
可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物
(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假
陽性反應(yīng)。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑。
⑵ 試劑的準(zhǔn)備
按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包
括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測量較正。從冰箱中取出
的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰
箱保存。
⑶加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物
加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。
⑷保溫
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi)。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn),一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測定。
⑸洗滌
可分為浸泡式和流水沖洗式兩種洗滌方式。
⑹顯色和比色
?顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)
的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。
?比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比
色架中。以軟板為載體的試驗(yàn),需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。
?酶標(biāo)比色儀
簡稱酶標(biāo)儀,通常指于測讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。
⑺結(jié)果判斷
①定性測定
a.間接法和夾心法
陽性判定值;標(biāo)本/陰性對照比值。
b. 競爭法
陽性判定值法;抑制率法。
②定量測定
組織血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1(ACE1)活性比色法定量檢測試劑盒20次*
組織血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)總活性熒光定量檢測試劑盒20次*
組織血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)總活性比色法定量檢測試劑盒20次*
組織腺苷酸激酶(Adenylate kinase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次*
組織腺苷酸環(huán)化酶(Adenylate Cyclase)活性熒光定量檢測試劑盒20次*
組織腺苷酸環(huán)化酶(Adenylate Cyclase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次*
組織線粒體NADH氧化酶活性定量檢測試劑盒20次*
組織纖維素酶(cellulase)活性熒光定量檢測試劑盒20次*
RANTES 小鼠趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-FAK (Tyr407) 磷酸化粘著斑激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse IgA 兔抗小鼠IgA抗體 規(guī)格 0.2ml
TIMP-1(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1 96T
SKI 英文名稱: C-SKI抗體 0.1ml
C3orf33 英文名稱: 3號染色體開放閱讀框33抗體 0.2ml
Anti-Phospho-FAK (Tyr407) 磷酸化粘著斑激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)酶聯(lián)免疫試劑盒cFn(Human cellular fibronectin) ELISA kit 人細(xì)胞纖維連接蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-X protein (C-Terminus) 抗乙肝病毒X蛋白抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HDHD2B/LHPP HDHD2B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
GsaR(Human gastrin receptor) ELISA Kit 人促胃液素受體 96T
Peroxiredoxin 2 英文名稱: 硫氧還蛋白過氧化物酶Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體 0.1ml
C1orf149 英文名稱: 1號染色體開放閱讀框149抗體 0.2ml
Anti-X protein (C-Terminus) 抗乙肝病毒X蛋白抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml