單純皰疹病毒II型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

單純皰疹病毒II型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶(hù)只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
PCR基本操作：?

產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格	分類(lèi)
單純皰疹病毒II型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)	50T	PCR檢測(cè)試劑盒

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
 BT-474(人導(dǎo)管細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

玫瑰紅鈉 質(zhì)量AR Rhodizonic acid sodium salt

 紫芝 Ganoderma japonicum香菇 Lentinula edodes

靛藍(lán)二磺鈉 質(zhì)量AR Indigo carmine

 COLO全細(xì)胞裂解液釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

百里藍(lán)鈉 質(zhì)量AR Bromothymol blue sodium salt

 芽胞桿 Bacillus sp.CaCO2全細(xì)胞裂解液

變色鈉,鉻變二鈉 質(zhì)量AR Chromotropic acid disodium salt dihydrate

 藍(lán)微褐鏈 Streptomyces cyaneofuscatus黃直絲鏈 Streptomyces flavorectus

特地游離 質(zhì)量>98%,BR Tedizolid free base

 人皮膚成纖維樣細(xì)胞人卵巢細(xì)胞

特地;特地酯 質(zhì)量>99%;BR Tedizolid phosphate;TR-701FA

 MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞小鼠神經(jīng)干細(xì)胞

3--2-并噻腙，水合 質(zhì)量>98%,BR MBTH hydrochloride hydrate

 異常漢遜酵母 Hansenula anomala異常漢遜酵母 Hansenula anomala

赤蘚紅;赤蘚紅B鈉 質(zhì)量BS Erythrosin B sodium saltLMO4英文名稱(chēng)：HEXA載脂蛋白A1體

Lck/p56-LCK英文名稱(chēng)：HECW1自噬相關(guān)蛋白16A體

CD85c英文名稱(chēng)：HAAO化自噬相關(guān)蛋白4D體

LTB4-R1/BLTR英文名稱(chēng)：HAP40化自噬相關(guān)蛋白4C體

LIR-6英文名稱(chēng)：HIPPI化自噬相關(guān)蛋白7體

LAG-3/CD223英文名稱(chēng)：HYPE化自噬相關(guān)蛋白16A體

LAIR-1英文名稱(chēng)：Huntingtin化自噬相關(guān)蛋白9A體

Langerin/CD207英文名稱(chēng)：HAP1化自噬相關(guān)蛋白4D體
單純皰疹病毒II型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。