線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH微量法

基本信息：

產(chǎn)品名稱：線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH微量法

測試方法:微量法

規(guī)格 : 100管/96樣

貨號：YS-01S6333

測定意義

復(fù)合體Ⅰ（EC 1.6.5. 3）又稱NADH-CoQ 還原酶或NADH脫氫酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是線粒體內(nèi)膜中最大的蛋白復(fù)合物。該酶催化一對電子從NADH傳遞給CoQ，同時(shí)可使O2還原生成O2.-，是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生O2.-的主要部位。測定該酶活性，不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈（ETC）狀態(tài)，而且可以反映活性氧（ROS）生成狀態(tài)。

測定原理

復(fù)合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+，在340nm下測定NADH的氧化速率計(jì)算出該酶活性的大小。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
用途范圍：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

需自配儀器：

1、酶標(biāo)儀（比色測定波長為450nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、微量移液器

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

人層粘蛋白(LN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枝狀枝孢UCHL1 (D8R2I) XP® Rabbit mAb

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人基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)酶聯(lián)吸附測定試劑盒豬丹絲IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb

人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒棒曲霉IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb

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人降鈣素(CT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 黑木耳8808PAI-1 (D9C4) Rabbit mAb

人促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 空腸彎曲桿MDH2 (D8Q5S) Rabbit mAb

人乙酰輔乙酰轉(zhuǎn)移酶2(ACAT2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母Phospho-cdc25C (Ser216) Blocking Peptide

人催乳素(PRL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒高粱生平臍蠕孢EWS Antibody

人肌紅蛋白(MYO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒糞腸球NFI-C Antibody

人肌鈣蛋白T(Tn-T)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 彩色豆馬勃CHD4 (D8B12) Rabbit mAb

人肌鈣蛋白I(Tn-I)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉PC1/3 Antibody

人相關(guān)漿蛋白A(PAPPA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒大腸埃希氏ENSA (D5Z1U) Rabbit mAb
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH微量法芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體Human MAML3 ELISA Kit小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子（vWF）ELISA試劑盒,

磷酸化芳香N-乙?；D(zhuǎn)移酶抗體Human MAN2B2 ELISA Kit小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物（PAP）ELISA試劑盒,

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human MAN1A2 ELISA Kit抗糖蛋白抗體（GP）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Human MANBAL ELISA Kit百日咳素（PT）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白DOC6抗體Human MANSC1 ELISA Kit血吸蟲（schistosoma）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體Human MANEA ELISA Kit輪狀病抗原（RV Ag）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

激活素受體相互作用蛋白1抗體Human MAP4K1(MEK Kinase Kinase 1) ELISA Kit鈣調(diào)素（CAM）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

固酮類還原酶家族7成員A2抗體Human MAP4K2 ELISA Kit小鼠P選擇素（P-Selectin/CD62P）ELISA試劑盒,