磷脂酶D(PLD)可見分光光度法

需自配儀器：

1、酶標(biāo)儀（比色測定波長為450nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、微量移液器

基本信息：

產(chǎn)品名稱：磷脂酶D(PLD)可見分光光度法

測試方法:可見分光光度法

規(guī)格 : 50管/48樣

貨號：YS-01S6713

測定意義

磷脂酶D（EC3.1.4.4）即磷脂酰膽堿水解酶，是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類酶的總稱，廣泛存在于高等動植物和細(xì)菌等多種生物體中，具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

測定原理

磷脂酶D催化水解磷脂酰膽堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和膽堿，膽堿在膽堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過氧化氫，過氧化氫在過氧化氫酶的作用下將4-氨基安替比林和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì)，在500nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋，無水乙醇。
用途范圍：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。

下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

豬環(huán)腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH/CD38)酶聯(lián)吸附測定試劑盒德爾布有孢酵母Human T Cell Co-inhibitory and Co-stimulatory Receptor IHC Antibody Sampler Kit

豬轉(zhuǎn)錄激活因子-1(ATF-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母RagD Antibody

豬速激肽受體2(TACR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒腐殖質(zhì)鏈霉RagD Antibody

豬補(bǔ)體受體2 (CR2/CD21)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 絲衣霉SMARCAL1 (D3P5I) Rabbit mAb

豬可溶性因子受體(sCKR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒美澳型核果褐腐病SimpleChIP® Human GAPDH Promoter Primers

豬G蛋白偶聯(lián)受體37(GPR37)酶聯(lián)吸附測定試劑盒阿克蘇海洋桿PKCα (D7E6E) Rabbit mAb (PE Conjugate)

豬成纖維生長因子19( FGF19)酶聯(lián)吸附測定試劑盒綠色木霉HPK1 Antibody

豬單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)酶聯(lián)吸附測定試劑盒阮氏Pan-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D54) XP® Rabbit mAb

豬纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯草芽孢桿Pan-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D54) XP® Rabbit mAb

豬IV D組磷脂酶A2(PLA2G4D)酶聯(lián)吸附測定試劑盒構(gòu)巢曲霉Na

豬乙酰膽堿酯酶關(guān)聯(lián)蛋白(ACHAP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  殼Scribble Antibody

豬甘露糖凝集素受體(MBLR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 巴斯德酵母ABCG2 Antibody

豬基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素(MAT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒博伊丁假絲酵母NRCAM (D2H1T) Rabbit mAb

豬肌球蛋白重鏈1(MYH1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 史氏芽孢桿SimpleChIP® Human GAPDH Intron 2 Primers

豬激肽原1(KNG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 長枝木霉Phospho-PTPα (Tyr789) Antibody
磷脂酶D(PLD)可見分光光度法間粘附分子-1抗體Human FBL(Fibrillarin) ELISA Kit小鼠白介素7（IL-7）ELISA試劑盒,

間粘附分子1抗體Human ERβ(Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit大鼠周期素D3（Cyclin-D3）ELISA試劑盒,

間粘附分子-1抗體Human ETRB(Endothelin Receptor B) ELISA Kit大鼠游離狀腺原氨酸（Free-T3）ELISA試劑盒,

間粘附分子-1抗體Human ETRA(Endothelin Receptor A) ELISA Kit倉鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）ELISA試劑盒,

間粘附分子-1抗體Human EXT1(Exostoses 1) ELISA Kit豚鼠表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒,

親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIF抗體Human F1+2(Prothrombin Fragment 1+2) ELISA Kit高敏狀腺原氨酸（u-T3）ELISA試劑盒--動物，人

過氧化氫酶抗體Human F13(Coagulation Factor XIII) ELISA Kit氯化鎂孔雀綠肉湯（MM，RV Medium）

內(nèi)氯離子通道蛋白4抗體Human F7(Coagulation Factor VII) ELISA KitL-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽
選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。