詳細(xì)介紹
兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7912 | GABRD: G基受體δ/GABAA Rδ抗體 0.2ml |
AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | CYP11B2: 醛固酮合成酶CYP11B2抗體 0.2ml |
ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑(抗原) 0.5mg | ACCN1: 腦通道蛋白1抗體 0.2ml |
Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg | F1 operon positive regulatory protein(CT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端多肽) 0.5mg |
phospho-ALK (Tyr1604): 0酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 0.1ml | Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) 0酸化膜相關(guān)蛋白酪激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
CXCR3 ELISA Kit 大鼠CXC趨化因子受體3 96T | EGFL6 Others Human 人 EGFL6 / EGF-L6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
小鼠母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] | C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
成纖維細(xì)胞生長因子-8/纖維母細(xì)胞生長因子-8抗體 Anti-FGF-8/HBGF-8 0.1ml | 大鼠腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
phospho-BCAR1(Tyr165): 0酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體 0.1ml | ACTE1 非洲爪蟾胚胎細(xì)胞 |
NUGC-3人胃癌細(xì)胞 Human gasic cancer cells NUGC-3 1640+10% FBS | FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Somatostatin/GRIH 抗原 0.5mg | M619細(xì)胞,人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞 產(chǎn)氣莢膜梭菌 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;HuT 78 |
Anti-IL-17RB/FITC 熒光素標(biāo)記白介素-17B受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系 |
CM-R016大鼠胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | A875(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2 | 豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL3 中國倉鼠肺細(xì)胞,CHL/IU[CHL-11]細(xì)胞 C3H 10T1/2 2A6細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞 |
1.使用兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響兔原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。