鴿痘病毒PCR檢測試劑盒

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服務流程：

公司產品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer

5 μl     dNTP mix （2mM）

4 μl     引物1（10pM）

2 μl     引物2（10pM）

2 μl     Taq酶 （2U/μl）

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）

1 μl      加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

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實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項

１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。

２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。

３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。

公司正在出售的產品：

法尼基二磷suan合mei(FDPS)重組蛋白英文名稱：Recombina Farnesyl Diphosphate Syhase (FDPS)物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

前蛋白轉化mei枯草溶菌su9(PCSK9)重組蛋白英文名稱：Recombina Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 (PCSK9)物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

前蛋白轉化mei枯草溶菌su9(PCSK9)重組蛋白英文名稱：Recombina Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 (PCSK9)物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

前蛋白轉化mei枯草溶菌su1(PCSK1)重組蛋白英文名稱：Recombina Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 1 (PCSK1)物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

彈性蛋白mei2A(ELA2A)重組蛋白英文名稱：Recombina Elastase 2A (ELA2A)物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

-胡蘿卜su-15,15'-單加氧mei1(bCMO1)重組蛋白英文名稱：Recombina Beta-Carotene-15,15'-Monooxygenase 1 (bCMO1)物種：Homo sapiens (Human，人)

吲哚胺2,3-雙加氧mei2(IDO2)重組蛋白英文名稱：Recombina Indoleamine-2,3-Dioxygenase 2 (IDO2)物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

前膠原賴氨suan-1,2-酮戊二suan-5-雙加氧mei1(PLOD1)重組蛋白英文名稱：Recombina Procollagen Lysine-1,2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 1 (PLOD1)物種：Homo sapiens (Human，人)

前膠原賴氨suan-2-酮戊二suan-5-雙加氧mei1(PLOD2)重組蛋白英文名稱：Recombina Procollagen Lysine-2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 2 (PLOD2)物種：Homo sapiens (Human，人)

前膠原賴氨suan-2-酮戊二suan-5-雙加氧mei1(PLOD3)重組蛋白英文名稱：Recombina Procollagen Lysine-2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 3 (PLOD3)物種：Homo sapiens (Human，人)
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