詳細介紹
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
參數規(guī)格:
貨號:YS-01P6420
產品規(guī)格:48T 0.2PCR管
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
亞甲基藍 Biological stainN,N,N',N'-四甲基-1,3-二 97%兔子基質金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒
亞甲基藍 超純級,Dye content, >90%(HPLC)納米氮化鋁 99.9% metals basis,50nm兔子基質金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒
孔雀石綠 AR氮化鋁 N >33.0%, D50/2.0 μm兔子基質金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒
鎂試劑Ⅰ 高純級,90%氮化鋁 N >32.5 % ,D97/5.0 μm兔子基質金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒
鎂試劑Ⅰ AR納米鋇鐵氧體 30-50nm 球形 99.5%兔子肌鈣蛋白C(TnC)免疫試劑盒
鎂試劑Ⅱ AR納米鋇鐵氧體 200nm,99%兔子黃體生成(LH)免疫試劑盒
甲基紫 AR納米鉍粉 99.9% metals basis,40nm,球形兔子環(huán)磷鳥(cGMP)免疫試劑盒
甲基紫 IND(pH 0.1-2.0)三氧化二鉻 60nm 球形,98.0%兔子核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)免疫試劑盒
1-亞硝基-2-萘酚 96%納米鐵鈷 40nm 球形 99.5%兔子核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒
橙黃G BS納米碳粉 99.5%,30nm兔子胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒
橙黃G AR,≥80.0% (HPLC)四氧化三鈷 30nm 球形,99.5%兔子骨形成蛋白2(BMP2)免疫試劑盒
橙黃G AR,≥80.0% (HPLC)氧化鏑 40nm 球形,99.5%兔子骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒
橙黃G ≥96%(HPLC)石墨 99%,40nm兔子骨膠原交聯/Ⅰ型膠原C端肽(Cr/CTX-Ⅰ)免疫試劑盒
油紅O Biological stain納米羥基磷灰石 nanopowder,<100 nm particle size (BET), ≥97%兔子骨膠原交聯(Cr)免疫試劑盒
橙黃Ⅳ Indicator納米四氧化三鐵 99.5%,20nm 球形兔子骨性磷(BALP)免疫試劑盒
水牛源性成分核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管人cAMP反應元件結合蛋白(CREB)ELISA試劑盒,5--2-(易)腺環(huán)化4抗體
小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒,4-氨基-嘧啶-5-腺活化蛋白激γ1抗體
小鼠戊糖(Pentosidine)ELISA試劑盒,4,6-二甲基-2-(易)芳香N-乙酰化轉移抗體
小鼠組織蛋白去乙酰化(HD)ELISA試劑盒,N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-D-色氨腺環(huán)化8抗體
小鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)ELISA試劑盒,N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-D-色氨腺環(huán)化10抗體
大鼠脂蛋白脂(LPL)ELISA試劑盒,3,4,5-三腺環(huán)化5抗體
大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒,3,4,5-三腺環(huán)化6抗體
大鼠膠質系來源的神經營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒,β-糖腺環(huán)化9抗體