商品屬性:
商品介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研測(cè)定意義
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個(gè)斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個(gè)葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。
測(cè)定原理:
GP催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測(cè)定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)時(shí)測(cè)定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)時(shí)測(cè)定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。
粗酶液提取:
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測(cè)。
2. 細(xì)菌或細(xì)胞:按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3. 血液可直接測(cè)定,或者適當(dāng)稀釋后測(cè)定。
測(cè)定步驟:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對(duì)照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。
6. 測(cè)定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測(cè)定管和對(duì)照管每個(gè)樣均需做。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
兔胰島樣生長(zhǎng)因子2受體(IGF2R)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黑木耳PSYI (TTH111I)
兔中心體蛋白110(CEP110)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒松口蘑MSSI (PMEI)
兔二氫嘧樣2(DPYSL2)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Corynebacterium urealyticum MSSI (PMEI)
兔球蛋白G Fc段受體II(FcγR II/CD32)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 中慢生華癸根瘤TASI (TSP509I)
兔蛋白3(PR3)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒鮭氣單胞TASI (TSP509I)
兔促甲狀腺(TSH)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒糙孢籃狀TAAI (HPYCH4III)
兔鈣調(diào)磷(CaN)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 彎孢TAAI (HPYCH4III)
兔纖維連接相關(guān)抗原(FRA)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 谷棒桿SCHI (MLYI)
兔前列腺F(PGF)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒佛羅里達(dá)側(cè)耳XAPI (APOI)
兔嗅4(OLFM4)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒葡萄座腔CAII (ALWNI)
兔紅生成受體(EPOR)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 假單胞BSEMII (BSPCNI)
兔半乳凝集12(GAL12)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黑曲霉APAI
兔Rho關(guān)聯(lián)卷曲螺旋蛋白激2(Rock-2)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒波蘭青霉APAI
兔C-Myc結(jié)合蛋白(MYCBP)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒猴頭BME1390I
兔白三烯A4水解(LTA4H)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 蘇云金芽胞桿BME1390I
糖原磷酸化酶b(GPb)微量法糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體Human UBA5 ELISA Kit雞γ干擾(IFN-γ)Elisa測(cè)定試劑盒
高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體Human BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) ELISA KitCC趨化因子受體1抗體流式組化
胞漿區(qū)相關(guān)蛋白GIPC2抗體Human UBA6 ELISA Kit兔抗DLX4抗體流式組化
糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體Human UBAC2 ELISA Kit3-磷甘油醛脫氫(兔來源組化用抗體流式組化)
促代謝型谷受體2抗體Human UBASH3A ELISA Kit谷半胱γ合成抗體流式組化
G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Human TXNDC5(Thioredoxin domain-containing protein 5) ELISA Kit膠質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體流式組化
β1-6 N-乙酰基葡萄糖轉(zhuǎn)移6抗體Human UBAP1 ELISA Kit庚型肝炎病抗體流式組化
?;?/span>/β-基乙磺抗體Human TXNDC4 ELISA Kit胰島樣生長(zhǎng)因子-I受體抗體流式組化