詳細介紹
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
服務(wù)流程:
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
豬水泡病病毒PCR檢測試劑盒 | Swine Vesicular Disease Virus(SVDV)RTPCR | 50次 |
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實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
公司正在出售的產(chǎn)品:
激肽釋放mei12(KLK12)重組蛋白英文名稱:Recombina Kallikrein 12 (KLK12)物種:Homo sapiens (Human,人)
激肽釋放mei13(KLK13)重組蛋白英文名稱:Recombina Kallikrein 13 (KLK13)物種:Homo sapiens (Human,人)
激肽釋放mei14(KLK14)重組蛋白英文名稱:Recombina Kallikrein 14 (KLK14)物種:Homo sapiens (Human,人)
肌肉磷suan果糖激mei(PFKM)重組蛋白英文名稱:Recombina Phosphofructokinase, Muscle (PFKM)物種:Homo sapiens (Human,人)
肌肉磷suan果糖激mei(PFKM)重組蛋白英文名稱:Recombina Phosphofructokinase, Muscle (PFKM)物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
肝臟磷suan果糖激mei(PFKL)重組蛋白英文名稱:Recombina Phosphofructokinase, Liver (PFKL)物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
肌球蛋白ⅤA(MYO5A)重組蛋白英文名稱:Recombina Myosin VA (MYO5A)物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
乙酰復(fù)合胺-O-甲基轉(zhuǎn)移mei(ASMT)重組蛋白英文名稱:Recombina Acetylserotonin-O-Methyltransferase (ASMT)物種:Homo sapiens (Human,人)
蛋白酪氨suan磷suanmeiⅣA3(PTP4A3)重組蛋白英文名稱:Recombina Protein Tyrosine Phosphatase Type IVA 3 (PTP4A3)物種:Homo sapiens (Human,人)
乙酰乙酰轉(zhuǎn)移mei2(ACAT2)重組蛋白英文名稱:Recombina Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2 (ACAT2)物種:Homo sapiens (Human,人)
豬水泡病病毒PCR檢測試劑盒烷基甘油單加氧mei(AGMO)ELISA試劑盒Human Alkylglycerol Monooxygenase(AGMO)ELISA Kit
外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)ELISA試劑盒Human Peripheral Myelin Protein 22(PMP22)ELISA Kit
外周蛋白2(PRPH2)ELISA試劑盒Human Peripherin 2(PRPH2)ELISA Kit
外周蛋白(PRPH)ELISA試劑盒Human Peripherin(PRPH)ELISA Kit
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。