詳細介紹
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:榛果源性核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管
貨號:YS-01P6431
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.1PCR管
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
2,7-二羥基萘 97%4-甲硫基 97%兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)免疫試劑盒
7-甲氧基-2-萘滿酮 98%3-甲氧基-5-三 97%兔過氧化物體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)免疫試劑盒
二(2-乙基己基)磷酯 95%3,4-(亞甲基二氧基) 98%兔過氧化物體增殖物激活受體γ(PPARG)免疫試劑盒
二(2-乙基己基)磷酯 CP2-萘 97%兔過氧化物體增殖物激活受體β(PPARβ)免疫試劑盒
二(2-乙基己基)磷酯 95%1-BOC-吡咯-3- 98%兔過氧化物體增殖物激活受體α(PPARA)免疫試劑盒
對 97%4-正戊基 97%兔骨橋(OPN)免疫試劑盒
對 99%2-吲哚酮 99%兔骨鈣/骨谷氨蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒
對 用于光譜測定, ≥99.5% (HPLC)4-基 96%兔骨保護(OPG)免疫試劑盒
鹽肼 99% 97%兔鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)免疫試劑盒
肼 AR,98.0%2,3,4,5,6-五基 97%兔干擾誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒
硫肼 CP,98.0%4-正氧基 97%兔鈣結(jié)合蛋白(CALB2)免疫試劑盒
馬來酰肼 98%2,3,4-三 96%兔兒茶酚(CA)免疫試劑盒
甲基三辛基(R=C8-C10) 90%2,4,6-三 96%兔多肽YY(PYY)免疫試劑盒
N-丁基溴化吡啶 99%2-(三甲基) 97%兔對氧磷-1(PON1)免疫試劑盒
芐基三丁基 98%4-三甲氧基 98%兔乙酰轉(zhuǎn)移(CHAT)免疫試劑盒
榛果源性核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管大鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA試劑盒,唑來磷一水化合物激受體相關蛋白16抗體
大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒,唑來磷一水化合物β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體
大鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒,3- 巰基正酯含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族13抗體
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒,2--5-甲(易)β淀粉樣肽(31-35)/Aβ 31-35 抗體
豬髓磷脂性蛋白(MBP)ELISA試劑盒,2--5-甲(易)β淀粉樣肽 1-40(C端)抗體
雞1,3-βD葡葡糖(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒,2--5-甲(易)β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體
駱駝內(nèi)皮1(ET-1)ELISA試劑盒,4--2-三基異酯炭疽桿菌抗體
山羊促生長激釋放激(GHRH)ELISA試劑盒,3-(二基膦基)腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體