實(shí)驗(yàn)方法步驟:
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:派琴蟲核酸檢測試劑盒48T 0.2八聯(lián)獨(dú)蓋
貨號:YS-01P6587
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.2八聯(lián)獨(dú)蓋
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
并咪唑 AR,98.5%烏金甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人N-甲基-D-天冬氨受體(NMDAR)免疫試劑盒
并咪唑 CP,98.0% 新橙皮 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)免疫試劑盒
2- 99%荷葉 分析標(biāo)準(zhǔn)品人N端中段骨鈣(N-MID-OT)免疫試劑盒
4- 99%異甘草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒
3- 98%諾米林 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人NOD樣受體(NLR)免疫試劑盒
2,6-二羥基甲 98%蕓香柚皮 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人NET-1 免疫試劑盒
二乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品桔梗皂D 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人NADPH氧化3(NOX3/MOX2)免疫試劑盒
二乙 99%松酯二葡萄糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98% 人NADPH氧化1(NOX1/MOX1/NOH1)免疫試劑盒
4,6-二甲氧基-2-甲磺酰基嘧啶 98%人參二 分析標(biāo)準(zhǔn)品人Na+/H+交換體3(NHE3)免疫試劑盒
4,6-二羥基嘧啶 99%人參三 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98人N1,N12-二乙酰基精 免疫試劑盒
2,4-二 98%原人參二 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人N(ε)羧乙基賴氨(CEL)免疫試劑盒
鄰 96%遠(yuǎn)志 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%人N -甲基- D -天冬氨抗體IgG(NMDA Antibody IgG)免疫試劑盒
對 98%安石榴甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人MYC誘導(dǎo)核抗原(MINA)免疫試劑盒
1-萘 98%擬人參皂F11 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人MAX二聚化蛋白1(MXD1)免疫試劑盒
4-羥基乙酮 98%原人參三 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人MAP磷雙特異性磷1(DUSP-1)免疫試劑盒
派琴蟲核酸檢測試劑盒48T 0.2八聯(lián)獨(dú)蓋人白介16(IL-16)ELISA試劑盒,IL-16 ELISA kit2-溴-6-氨基吡啶鈣粘附分子10抗體
人皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒,Cortisol ELISA4,6-二羥基-2-甲硫基嘧啶R Cadherin/CDH4
人鈣調(diào)磷(CaN)ELISA試劑盒,CaN ELISA4,6-二羥基-2-甲硫基嘧啶大鼠細(xì)小病H-1株(H-1)抗體
人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒,芐氧基乙酰22號染色體開放閱讀框9抗體
人T活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒,芐氧基乙酰腫瘤高表達(dá)周期相關(guān)蛋白抗體
人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒,芐氧基乙酰9號染色體開放閱讀框117抗體
小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒,4'-羥基聯(lián)基-4-甲6號染色體開放閱讀框120抗體
小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒,4'-羥基聯(lián)基-4-甲補(bǔ)體C1qα鏈多肽抗體