詳細介紹
大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基
大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細胞基礎培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復蘇大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基密度。
2)細胞傳代:如果大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
胞吞調(diào)控蛋白Eps15抗體 | 黑色素瘤相關抗原B4抗體 |
細胞色素氧化酶亞基3抗體 | 層粘蛋白α4抗體(Lamininα4) |
巨噬細胞炎性蛋白19抗體 | 人小腦星形膠質(zhì)細胞cDNAHA-c cDNA |
淀粉樣肽前體蛋白抗體 | 劍蛋白p60亞基A1抗體 |
淋巴細胞衍生C-型凝集素抗體 | DIM-7蛋白抗體 |
KIT Others Human 人 KIT / c-KIT / CD117 (aa 540-972) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | PA319(人大腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
β1,3半乳糖轉(zhuǎn)移酶3抗體 | CL-0332Dami(人巨核細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2 |
原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 | 其他細胞因子 |
血小板47蛋白抗體 | HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
6抗體 | PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
銅代謝結(jié)構域蛋白10抗體 | COL9A1 Others Human 人 COL9A1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
P19細胞,小鼠畸胎瘤細胞 MCF7(癌細胞) 人橫紋肌肉瘤細胞;A-204 | 大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 Rattus | HDLEC Pellet 人類皮膚淋巴管內(nèi)皮細胞團塊(少年者) > 1 mio.cells 少突膠質(zhì)前體細胞生長添加物OPCGS |
人正常肝細胞;L-02 人結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | PLAUR Others Mouse 小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1.使用大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基時應注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基正常使用。