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詳細(xì)介紹
大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
RAB6蛋白抗體 | 黑色素瘤相關(guān)抗原10抗體 |
酸化周期素依賴性激酶6抗體 | 補(bǔ)體應(yīng)答基因32抗體 |
CD40L抗體 | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H209 |
腺瘤肉調(diào)節(jié)蛋白抗體 | 剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4抗體 |
淋巴細(xì)胞抗原76抗體 | DNA聚合酶α2抗體 |
CTF1 Others Human 人 Cardioophin-1 / CTF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白 |
α葡萄糖苷酶2抗體 | CL-0350Hela S3(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
原活化的蛋白激酶p38β抗體 | EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 |
血清抗體 | CSNK2A1 Others Mouse 小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
鈣激活鉀通道蛋白4抗體 | TF Others Rat 大鼠 ansferrin / TF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子HESX1抗體 | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
45.6.TG1.7細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞,HuT 78細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901 | 大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
FGF1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 aFGF / FGF1 蛋白 | NCI-H446(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 COLO 205(結(jié)腸癌細(xì)胞) |
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | Promocell C-27001 Osteoblast Growth Medium, 成骨細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml |
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