化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T | YS-01P6338 |
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴(kuò)增（其中一個引物為熒光標(biāo)記）。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測定熒光強(qiáng)度，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記，下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強(qiáng)度，以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合，再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn)，若加入內(nèi)標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。
操作程序：
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
二、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
硬酯乙酯 97%苯 MDI級,≥99.98%(GC)豬鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2α(CAMK2A/CAMKA/KIAA0968)免疫試劑盒
固藍(lán)RR鹽 AR苯乙烯 Standard for GC，>99.5%（GC)豬脯氨羥化(PHD)免疫試劑盒
葉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%苯乙烯 CP,含10-15ppm 4-叔-丁基鄰苯二酚穩(wěn)定劑豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒
固藍(lán)B 90%苯乙烯 99%,含10-15ppm 4-叔-丁基鄰苯二酚穩(wěn)定劑豬肺炎支原體抗體(MP-Ab)免疫試劑盒
高鐵試劑 98.5%苯乙烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)免疫試劑盒
固藍(lán)BB鹽 AR苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：二硫化碳豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒
4--3-硝基三甲苯 99%苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液0.88mg/ml，溶劑:甲豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免疫試劑盒
核黃-5′-磷鈉鹽水合物 73-79%(HPLC)苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml豬二氧化(DAO)免疫試劑盒
戊菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，100%甲基叔丁基 色譜級,≥99.9% (GC)豬兒茶酚(CA)免疫試劑盒
甲脒鹽鹽 96%乙基苯 >99.5%(GC)豬多肽YY(PYY)免疫試劑盒
(+)-葑酮 standard for GC, ≥99.5% (GC)2-丁酮 ACS, ≥99.0%豬多巴(DA)免疫試劑盒
甲 for LC-MS, ~98% (T)1,2,4-苯 98%豬端粒(TE)免疫試劑盒
固黑K鹽 80%2,5-二氯 99%豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)免疫試劑盒
固紅 3 GL Biological stain降烯二酐 99%豬淀粉樣前體蛋白(βAPP)免疫試劑盒
固紅RC 生化試劑級降烯二酐 95%豬低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)免疫試劑盒
諾如病毒GⅡ型RNA核酸檢測試劑盒48TⅠ型膠原（Col Ⅰ）ELISA試劑盒--動物，人磷鑭(III) 水合物 (REO)血管緊張Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體
抗流行性出血熱病抗體IgG （EHF）ELISA試劑盒--動物，人反式二氨基二氯化鉑(II), Pt min膜粘連蛋白2受體抗體
戊型肝炎病IgG（HEV-IgG）ELISA試劑盒--動物，人反式二氨基二氯化鉑(II), Pt min血管緊張1轉(zhuǎn)換抑制劑抗體
我妻氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)氯化鈥(III)六水合物拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體
小鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白1（IGFBP-1）ELISA試劑盒,氯化鈥(III)六水合物α-1抗胰糜蛋白抗體
小鼠腎上腺（EPI）ELISA試劑盒,鹽芐絲肼α-1抗胰蛋白抗體
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA（α-Fodrin IgG/IgA）ELISA試劑盒,鹽芐絲肼ATP結(jié)合蛋白家族6抗體
小鼠Ⅹ（FⅩ）ELISA試劑盒,亞葉鈣水合物三磷腺結(jié)合盒亞家族G1抗體
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