詳細介紹
大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基
大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細胞基礎培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復蘇大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞密度。
2)細胞傳代:如果大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞時應注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞正常使用。
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體 | 核突觸蛋白抗體 |
10號染色體開放閱讀框81抗體 | 補體C1qTNF9鏈多肽抗體 |
1號染色體開放閱讀框226抗體 | 人羊膜上皮細胞cDNAHAmEpiC cDNA |
Apollon凋亡抑制蛋白抗體 | 鉀通道蛋白DRK1抗體 |
離子通道蛋白Kv1.3抗體 | Notch信號通路Delta樣配體3抗體 |
小鼠干細胞(EGFP標記) | 豚鼠皮膚細胞;GP-S3 |
X染色體開放閱讀框56抗體 | CL-0411PA-1(人卵巢腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
成熟T淋巴細胞增殖蛋白1抗體 | 人結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T] |
血管內(nèi)皮生長因子受體1抗體 | 大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3 結(jié)腸腺癌細胞,CW-2細胞 R1610細胞,中國倉鼠倉鼠肺細胞 |
Kelch樣蛋白11抗體 | 恒河猴腎細胞;RM-2 人骨髓樣甲狀腺癌細胞,TT細胞 TE-10(食管癌細胞) |
鐵氧化還原蛋白還原酶抗體 | 恒河猴腎細胞;LLC-MK2 膀胱癌細胞,RT4細胞 U-2 OS(骨肉瘤細胞) |
HMy2.CIR(人B淋巴母細胞) 5×106cells/瓶×2 mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細胞 人皮膚成纖維細胞;HSAS4 | 大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基豹貓肌肉成纖維樣細胞;LCM4 |
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92 [NK92] | ASAH2 Others Mouse 小鼠 ASAH2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SP2/0(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 AXR2 / CMG2 人細胞裂解液 (陽性對照) | HLF-a(人肺細胞) 5×106cells/瓶×2 藤黃微球菌/騰黃八疊球菌 |