實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
1. 稱量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開(kāi)箱取物
3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
4.過(guò)濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
公司專業(yè)代理ATCC菌種,*,質(zhì)量保證,為大中型科研提供嚴(yán)格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。
使用范圍:
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分*是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,組成成分精確,重復(fù)性強(qiáng),而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營(yíng)養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類,或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級(jí)種)、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無(wú)菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
保藏方法:
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
上皮粘附分子(EPCAM)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)根瘤Guinea pig F-Box Protein 2(FBXO2) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
乙酰A羧化α(ACACα)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)球孢白僵Guinea pig BK (Bradykinin) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
纖維蛋白肽B(FPB)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)梭Guinea pig PLAA (Phospholipase A2 Activating Protein) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
含血管性血友病因子A域蛋白2(vWA2)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)大麥類芽胞桿Guinea pig AQP-2 (Aquaporin 2) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
腺苷脫(ADA)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)球孢白僵Guinea pig β Manase 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
肌動(dòng)蛋白γ1(ACTγ1)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)大蓋小皮傘Guinea pig MCAM (Melanoma Cell Adhesion Molecule) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
轉(zhuǎn)錄激活因子5(ATF5)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)水生黃桿Guinea pig MART/Melan-A (Melanoma Marker A) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)黏瓊脂芽孢桿Guinea pig C9 (Complement Component 9) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
血栓A2(TXA2)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)環(huán)狀芽胞桿Guinea pig ITLN1 (Intelectin 1/Omentin) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
血小板激活因子乙酰水解Ⅰb3(PAFAH1B3)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)水生拉恩氏Guinea pig UCP-2 (Uncoupling Protein 2, Mitochondrial) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
轉(zhuǎn)錄激活因子7(ATF7)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)釀酒酵母Guinea pig SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
絲蛋白12(PRSS12)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)詹氏桿Guinea pig SEMA3A (Semaphorin 3A) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
原鈣黏β2(PCDHβ2)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)溜曲霉Guinea pig FSH (Follicle-Stimulating Hormone) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
腺苷環(huán)化2(ADCY2)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)米根霉Guinea pig TGF-α (Transforming Growth Factor α) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)茸毛褐褶Guinea pig ACTg1 (Actin Gamma 1) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
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