詳細介紹
MEF 細胞專用培養(yǎng)基
MEF細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MEF細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含 MEF細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MEF 細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
DMEM/F12基礎培養(yǎng)基 445 ml
特級胎牛血清 50 ml
P/S 5 ml
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復蘇MEF 細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查MEF 細胞密度。
2)細胞傳代:如果MEF 細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗MEF 細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若MEF 細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待MEF 細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用MEF 細胞時應注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本MEF 細胞的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響MEF 細胞正常使用。
腫瘤抑制基因p53抗體 | FAM150A蛋白抗體 |
轉(zhuǎn)鐵蛋白/血清鐵傳遞蛋白抗體 | 中心體蛋白AZI1抗體 |
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白抗體 | A498-EGFP-puro人腎癌細胞 Human renal cell carcinoma A498-EGFP-puro cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin |
酸化核仁酸蛋白抗體 | 醛縮酶C抗體 |
Fbxw7蛋白抗體 | 酸化細胞分裂周期蛋白16抗體 |
SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 | COLGALT2 Others Human 人 GLT25D2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
高爾基復合體CFR1抗體 | Hep-2, 人喉癌細胞系 骨髓瘤,45.6.TG1.7細胞 Hs888Lu(人肺成纖維細胞) |
酸化膀癌缺失基因1抗體 | ENPEP Others Mouse 小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
原酶(纖維介素)抗體 | 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A |
豬源產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌K88-K99抗體 | 3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 |
FbxW2蛋白抗體 | KiMA(人胚腎上皮細胞系) 5×106cells/瓶×2 |
人巨細胞白血病細胞株;Mo7e | MEF 細胞專用培養(yǎng)基HPASMC Pellet 人肺動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人肝臟細胞裂解物HHL |
THBD Others Rat 大鼠 Thrombomodulin / THBD 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H062人腎管狀上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
MDA-MB-415 人腺癌細胞 | 中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I |