致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環(huán)擴增，擴增產物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。

PCR基本操作：
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實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書phospho-p38 MAPK/MAPK14(Thr180/Tyr182)  化絲裂原活化蛋白激酶p38體進口/國產DYDC1  DYDC1蛋白體

MKK3/MEK3  絲裂原活化蛋白激酶MKK3體進口/國產DHP/Dihydropyrimidinase  二嘧啶體

Phospho-MKK3(Ser189)/MKK6(Ser207)  化絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6體進口/國產DPYD  二嘧啶脫酶體

MEK5/MAP2K5  絲裂原活化蛋白激酶激酶5體進口/國產DPY19L1  短粗矮胖19蛋白樣1體

phospho-MEK5(Ser142)  化絲裂原活化蛋白激酶激酶5體進口/國產VAV2  癌因VAV2體

SEK1/MKK4  絲裂原活化蛋白激酶激酶4體進口/國產DPY19L2  DPY19L2蛋白體

Phospho-MKK4(Ser80)  化絲裂原活化蛋白激酶激酶4體進口/國產DPY19L4  DPY19L4蛋白體C9orf86英文名稱：Argininosuccinate Lyase山羊白介1β(IL-1β)免疫試盒

C21orf128英文名稱：Arginyl tRNA synthetase山羊白介1α(IL-1α)免疫試盒

C6orf62英文名稱：Argonaute 3山羊白介18(IL-18)免疫試盒

CCZ1英文名稱：Argonaute 4山羊白介12(IL-12/P40)免疫試盒

Cerebral protein 5英文名稱：ARHGAP15山羊白介10(IL-10)免疫試盒

C21orf58英文名稱：ARID1B山羊阿黑皮原(POMC)免疫試盒

C20orf43英文名稱：ARIH2山羊γ干擾(IFN-γ)免疫試盒

C9ORF43英文名稱：ARFL1山羊β-脂蛋白(β-LP)免疫試盒
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。