詳細(xì)介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
鮑肌肉萎縮癥病毒PCR檢測試劑盒說明書 | Abalone Shriveling Syndromeassociated Virus(AbSV)PCR | PCR檢測試劑盒 |
PCR基本操作:
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
VNN2 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 人 VNN2 / Vanin-2 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Human
SULT1B1 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 人 SULT1B1 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Human
STK4 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 人 STK4 / MST1 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Human
S100A6 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 小鼠 S100A6 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Mouse
PCSK9 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 小鼠 PCSK9 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Mouse
MEP1A 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 小鼠 MEP1A ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Mouse
IL18R1 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 小鼠 IL18R1 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Mouse
DKK3 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 小鼠 DKK3 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Mouse
CLEC6A 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Mouse
CD34 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 小鼠 CD34 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Mouse
CD5 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 小鼠 CD5 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Mouse
AXL 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 小鼠 Axl Kinase ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Mouse
LAIR2 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 人 LAIR2 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Human
ICAM2 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 人 ICAM-2 / CD102 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Human
DLL1 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 人 DLL1 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Human
DDC 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 人 DOPA Decarboxylase / DDC ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Human
CST7 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 人 Cystatin F / CST7 ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Human
CD200R1 產(chǎn)品類型: Kit 產(chǎn)品描述: 食蟹猴 CD200R ELISA配對抗體 用途: ELISA 種屬: Cynomolgus
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豬細(xì)胞色素C氧化酶(COX)免疫試劑盒 進(jìn)口、分裝 英文名稱: Pig cytochrome C oxidase,COX ELISA kit
豬細(xì)胞色素c還原酶(CCR)免疫試劑盒 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱: Pig cytochrome c reductase,CCR ELISA kit
豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒 *直銷 英文名稱: Porcine intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit
豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2)免疫試劑盒 進(jìn)口、組裝 英文名稱: Porcine intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit
豬戊糖素(PE)免疫試劑盒 進(jìn)口、分裝 英文名稱: Pig pentosidine,PE ELISA kit
豬瘟抗體免疫試劑盒 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱: Classical Swine Fever Virus Antibody ELISA Kit
豬瘟抗體(IgM)免疫試劑盒 *直銷 英文名稱: Pig Anti-CSFV Antibody IgM ELISA Kit
豬瘟抗體(IgG)免疫試劑盒 進(jìn)口、組裝 英文名稱: Classical Swine Fever Virus Antibody IgG ELISA Kit
豬胃泌酸調(diào)節(jié)素(OXM)免疫試劑盒 進(jìn)口、分裝 英文名稱: Pig oxyntomodulin,OXM ELISA kit
豬偽狂犬病毒(PRV)抗體(IgG)免疫試劑盒 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱: Pig pseudorabies virus(PRV)antibody(IgG)ELISA kit
豬維生素D(VD)免疫試劑盒 *直銷 英文名稱: Pig Vitamin D,VD ELISA kit
豬褪黑素(MT)免疫試劑盒 進(jìn)口、組裝 英文名稱: Pig Melatonin,MT ELISA Kit
鮑肌肉萎縮癥病毒PCR檢測試劑盒說明書豬透明質(zhì)酸(HA)免疫試劑盒 進(jìn)口、分裝 英文名稱: Porcine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit
豬鐵蛋白(FE)免疫試劑盒 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱: Pig ferritin,FE ELISA Kit
豬糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)免疫試劑盒 *直銷 英文名稱: Pig Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。