需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
基本信息:
產(chǎn)品名稱:蔗糖磷酸化酶(SP)紫外分光光度法
測(cè)試方法:紫外分光光度法
規(guī)格 : 50管/48樣
貨號(hào):YS-01S6377
測(cè)定意義
SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷鍵,催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外,SP還能催化醌合成熊果苷,具有強(qiáng)的美白效果,在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。
測(cè)定原理:
SP能夠以磷酸為受體,催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖,在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH,導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測(cè)定340nm吸光度增加速率,即可計(jì)算SP活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1mL石英比色皿和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
人補(bǔ)體因子1R(Clr)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒MarisediminicolaBAF Complex Antibody Sampler Kit
人補(bǔ)體成分2(C2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 新月彎孢c-Myc (D84C12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
人補(bǔ)體成分5(C5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorumMRP4/ABCC4 (D1Z3W) Rabbit mAb
人補(bǔ)體因子8b(C8b)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 香菇SMYD3 (D2Q4V) Rabbit mAb
人補(bǔ)體因子8g(C8g)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 耐輻射奇球突變株Sin1 (D7G1A) Rabbit mAb
人補(bǔ)體成分9(C9)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 柱狀環(huán)傘(柳菇、茶新菇)Prostatic Acid Phosphatase (D3Y5P) Rabbit mAb
人補(bǔ)體因子B(CFB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 高大毛殼uPAR (D4Q5S) Rabbit mAb
人補(bǔ)體因子H(CFH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒Achromobacter denitrificansSimpleChIP® Human StAR Intron 1 Primers
人補(bǔ)體因子I(CFI)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒米根霉Glycolysis II Antibody Sampler Kit
人補(bǔ)體因子P(CFP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒嗜果刀孢LGP2 (D3I3L) Rabbit mAb
人補(bǔ)體成分3a(C3a)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 暗產(chǎn)色鏈霉SimpleChIP® Mouse MEST Intron 1 Primers
人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 鏈霉SignalSlide® NF-κB p65 IHC Controls
人補(bǔ)體片段3b(C3b)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 大腸埃希氏桿SignalSilence® Sharpin siRNA I
人補(bǔ)體片段3c(C3c)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 蘇云金芽孢桿DyLight™ 594 Phalloidin
人神經(jīng)肽Y受體Y2(NPYR2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒蘋果黑腐皮殼IRS-1 Inhibition Antibody Sampler Kit
蔗糖磷酸化酶(SP)紫外分光光度法絲氨酸抑制蛋白激酶C底物抗體Human MAGEA3(Melanoma-associated antigen 3) ELISA Kit強(qiáng)化梭鑒別瓊脂(DRCA)用于食品和其它物質(zhì)中梭的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)(MERCK方法)
核突觸蛋白α抗體Human MAGEA4 ELISA Kit人c-fos ELISA試劑盒,
自噬相關(guān)蛋白4B抗體Human MAGEA6 ELISA Kit人顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒,
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體Human MAGEA8 ELISA Kit人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA試劑盒,
α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體Human MAGEB1 ELISA Kit小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒,
堿性磷酸酶抗體Human MAGI1 ELISA Kit小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒,
AU1 tag標(biāo)簽抗體Human MAGIX ELISA Kit大鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒,
脂肪增強(qiáng)結(jié)合蛋白1Human MAGEB18 ELISA Kit大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒,
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。