詳細(xì)介紹
需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
基本信息:
產(chǎn)品名稱:谷氨酰胺合成酶(GS)可見分光光度法
測(cè)試方法:可見分光光度法
規(guī)格 : 50管/24樣
貨號(hào):YS-01S6515
測(cè)定意義
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對(duì)生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式。
測(cè)定原理
GS在ATP和Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨酰基異羥肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物;該絡(luò)合物在540nm處有最大吸收峰,可用分光光度計(jì)測(cè)定。
所需的儀器和用品
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
小鼠皮膚T虜獲趨化因子(CTACK)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒大腸埃希氏桿Phospho-p57 Kip2 (Thr310) Antibody
小鼠β-骨膠原交聯(lián)(β-CTx)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒海神弧EGR3 Antibody
小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒谷氨酸棒桿LRP6 (C5C7) Rabbit mAb
小鼠II型膠原(COL2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 茯苓LRP6 (C5C7) Rabbit mAb
小鼠cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢*Met (D1C2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)
小鼠c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒短裙竹蓀東北變種*PTK7/CCK4 (D2Z1N) Rabbit mAb
小鼠周期素依賴性激酶5(CDK5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒金黃殼囊孢Phospho-CDK2 (Thr160) Antibody
小鼠周期素依賴性激酶9(CDK9)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒乳酸桿p190-B RhoGAP Antibody
小鼠周期素依賴性激酶抑制因子1B(CDKN1B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒長(zhǎng)枝木霉RhoGDI Antibody
小鼠周期素D1(CCND1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黑平188Stat5 (D3N2B) Rabbit mAb
小鼠周期素D2(CCND2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒淺灰綠色鏈霉Stat5 (D3N2B) Rabbit mAb
小鼠周期素D3(CCND3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒白肉迷孔TCF4/TCF7L2 (C9B9) Rabbit mAb
小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CYPA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 印度毛殼SimpleChIP® Human c-Fos Upstream Primers
小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CYPB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 煙管Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素D(CYPD)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 蘋果鏈格孢(蘋果斑點(diǎn)落葉病)Phospho-LRP6 (Ser1490) Antibody
谷氨酰胺合成酶(GS)可見分光光度法9號(hào)染色體開放閱讀框91抗體Human FBXW4(F-box and WD repeat domain containing 4) ELISA KitD /E中和瓊脂用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物的分離培養(yǎng)(ACUMEDIA方法)
9號(hào)染色體開放閱讀框93抗體Human FBXO18 ELISA KitL-組氨酸鹽酸鹽
9號(hào)染色體開放閱讀框96抗體Human FBXW5 ELISA KitCBZ-硫苯基-L-半胱氨酸
9號(hào)染色體開放閱讀框98抗體Human FBXW7 ELISA Kit根皮苷 Phlorizin dihydrate
分裂周期蛋白5樣蛋白抗體Human FBXO22 ELISA Kit硅酸
鈣粘蛋白23抗體Human FCHSD1 ELISA Kit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒,
色素p450 2s1抗體Human FCRLB ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒,TIMP-4 ELISA kit
角蛋白16抗體Human FBXO28 ELISA Kit人膽酸(CA)ELISA試劑盒, CA ELISA kit
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。