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3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)微量法

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更新時間:2022-03-09 16:08:57瀏覽次數(shù):409

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號 YS-01S6655 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供于科研使用    
3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)微量法公司正在熱銷的產(chǎn)品:GLS小鼠谷氨酰胺酶ELISA檢測試劑盒
GS小鼠谷氨酰胺合成酶ELISA檢測試劑盒
GAD2小鼠谷氨酸脫羧酶2ELISA檢測試劑盒
GDH小鼠谷氨酸脫氫酶ELISA檢測試劑盒
GCLC小鼠谷氨酸半胱氨酸連接酶催化亞基ELISA方法

詳細介紹

圖片1.png

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)微量法

100管/96樣

微量法

YS-01S6655

商品介紹:

公司產(chǎn)品僅用于科研測定意義
GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶,與糖異生途徑、體內(nèi)血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān),在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。

測定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、無機磷和NAD,340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。

需自備的儀器和用品

分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍綠色之前均可使用。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測。

2. 細菌或細胞:按照細菌或細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

3. 血液可直接測定,或者適當(dāng)稀釋后測定。

測定步驟:

1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到510 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。

3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 對照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。

6. 測定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。

其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測定管和對照管每個樣均需做。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

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大鼠白介素6受體(IL-6R)酶聯(lián)吸附測定試劑盒華麗側(cè)耳(佛羅里達側(cè)耳)Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control

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