詳細(xì)介紹
基本信息:
產(chǎn)品名稱(chēng):輔酶ⅠNAD(H)微量法
測(cè)試方法:微量法
規(guī)格 : 100管/48樣
貨號(hào):YS-01S6321
測(cè)定意義
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(huán)(TCA)的主要?dú)涫荏w,生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時(shí),形成大量的ROS,同時(shí)NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過(guò)這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說(shuō)明細(xì)胞呼吸耗氧量較高,處于過(guò)氧化狀態(tài)。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外,NAD+降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。
測(cè)定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH,NADH通過(guò)PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT)為甲瓚,在570nm下檢測(cè)吸光值;而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,進(jìn)一步采用MTT還原法檢測(cè)。
需自備的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
Melamine/OVA 三聚氰胺偶聯(lián)雞卵白蛋白 1mg
Melamine/BSA 三聚氰胺偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mg
Melamine/Bov IgG 三聚氰胺偶聯(lián)牛IgG 1mg
GABA/KLH γ1氨基丁酸偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 1mg
GABA/BSA γ1氨基丁酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mg
OCT2 (Octamer-binding transcription factor 2) 陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗原 0.5mg
白介素17F(IL17F)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 17F (IL17F) 96T Rattus norvegicus (Rat)
色素上皮衍生因子(PEDF)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Pigment Epithelium Derived Factor (PEDF) 96T Homo sapiens (Human)
色素上皮衍生因子(PEDF)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Pigment Epithelium Derived Factor (PEDF) 96T Mus musculus (Mouse)
色素上皮衍生因子(PEDF)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Pigment Epithelium Derived Factor (PEDF) 96T Rattus norvegicus (Rat)
白介素33(IL33)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 33 (IL33) 96T Homo sapiens (Human)
白介素33(IL33)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 33 (IL33) 96T Mus musculus (Mouse)
白介素33(IL33)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 33 (IL33) 96T Rattus norvegicus (Rat)
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子3(FGF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 3 (FGF3) 96T Homo sapiens (Human)
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子3(FGF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 3 (FGF3) 96T Mus musculus (Mouse)
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子3(FGF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 3 (FGF3) 96T Rattus norvegicus (Rat)
顆粒體蛋白(GRN)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Granulin (GRN) 96T Homo sapiens (Human)
顆粒體蛋白(GRN)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Granulin (GRN) 96T Mus musculus (Mouse)
顆粒體蛋白(GRN)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Granulin (GRN) 96T Rattus norvegicus (Rat)
心營(yíng)養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1(CLCF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1 (CLCF1) 96T Homo sapiens (Human)
心營(yíng)養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1(CLCF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1 (CLCF1) 96T Mus musculus (Mouse)
心營(yíng)養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1(CLCF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1 (CLCF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 96T Homo sapiens (Human)
輔酶ⅠNAD(H)微量法同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 96T Mus musculus (Mouse)
同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
左右決定因子1(LEFTY1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Left/Right Determination Factor 1 (LEFTY1) 96T Homo sapiens (Human)