大鼠虹膜色素上皮原代細(xì)胞

大鼠虹膜色素上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代心臟微血管周細(xì)胞 HEC-1-B(人內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) SH-SY5Y 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 1ml/T75 LOVO 人結(jié)腸癌細(xì)胞 Hep G2 人肝癌細(xì)胞 小鼠原代淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞

大鼠虹膜色素上皮原代細(xì)胞

大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞分離自眼球虹膜組織；虹膜是眼睛構(gòu)造的一部分，屬于眼球中層，位于血管膜的最前部；在睫狀體前方虹膜，中心有一圓形開(kāi)口，稱(chēng)為瞳孔，猶如相機(jī)當(dāng)中可調(diào)整大小的光圈，內(nèi)含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強(qiáng)烈時(shí)，虹膜會(huì)收蹜，只使一小束光線穿透瞳孔，進(jìn)入眼睛；當(dāng)進(jìn)入黑暗環(huán)境中，虹膜就會(huì)往后退縮，使瞳孔變大，讓更多的光線進(jìn)入眼睛，多數(shù)的脊椎動(dòng)物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細(xì)胞（IPE）是虹膜重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，位于虹膜組織的后面，和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（RPE）同樣起源于神經(jīng)外胚葉層，可能具有相似的生物學(xué)功能，因此對(duì)IPE的研究將為防治因RPE結(jié)構(gòu)或功能異常而導(dǎo)致的眼底病提供新思路。

產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞

組織來(lái)源：眼球

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠虹膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠虹膜色素上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

小鼠αN已?；咸擒彰?span>(αNAG)ELISA 試劑盒

Rat aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒

Humanplacealactogen,HPLELISAKit 人胎盤(pán)催乳素(HPL)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanChromogranin,CgA試劑盒人嗜鉻蛋白A(CgA)試劑盒

總脂肪酶(lipase)定量試劑盒50次

Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)試劑盒

魚(yú)脫酶1(DIO1)ELISA試劑盒 ELISA 組裝/原裝

Human ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 人抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒

PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒 進(jìn)口分裝

ADVIgGIII腺病毒IgGⅢ型(間接法二步法)

血液乙醇脫氫酶III(谷胱苷肽-依賴(lài)性甲脫氫酶)活性比色法定量試劑盒20次

MouseSolubleEndoglin,ENG/sCD105ELISAKit小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)試劑盒

脂肪酸合成酶（FAS）測(cè)試盒   紫外分光光度法   50管/48樣

蔗糖0酸化酶(SP)測(cè)試盒   紫外分光光度法   50管/48樣

硫氧還蛋白氧化還原酶（xR）測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣

還原酶（GR）測(cè)試盒   紫外分光光度法   50管/48樣

CXCL13重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 Protein

Morphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 10mgMorphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯(lián)物

DAPK3重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白

PREP Protein Mouse 重組小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白

CA1 Others Human 人 CA1 人細(xì)胞裂解液   小鼠上皮細(xì)胞   食管上皮細(xì)胞Many   子宮成纖維細(xì)胞Many   中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1  DCS 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞 小鼠原代子宮內(nèi)膜干細(xì)胞 人原代內(nèi)皮祖細(xì)胞

大鼠虹膜色素上皮原代細(xì)胞CD14(cluster of differentiation antigen 14 0.5mgCD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/內(nèi)毒素受體抗原

ACYP2 Protein Human 重組人 ACYP2 / Acylphosphatase-2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

REN重組小鼠 REN1 / Renin-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NAMPT重組人 PBEF / Visfatin / NAMPT 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。