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詳細(xì)介紹
人滑膜原代細(xì)胞
人滑膜細(xì)胞分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu)，各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會(huì)累及滑膜。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，同時(shí)在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎（OA）以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?，其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個(gè)組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關(guān)節(jié)的退變?；ぜ?xì)胞是構(gòu)成滑膜層的大細(xì)胞群體，是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，它包埋在顆粒狀無(wú)定性的基質(zhì)中，基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布?；び?span>A型（巨噬樣滑膜細(xì)胞）、B型（成纖維樣滑膜細(xì)胞）以及C型（樹(shù)突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞）細(xì)胞組成?；ぜ?xì)胞主要功能：①滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤(rùn)滑液成分，并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤(rùn)滑液交換有關(guān)；②滑膜細(xì)胞增生，表現(xiàn)為不依賴于支持物生長(zhǎng)，并且分泌大量的效應(yīng)分子來(lái)促進(jìn)炎癥和關(guān)節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。
英文名稱 | Human Synovial Cells | 組織來(lái)源 | 滑膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7321 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人滑膜細(xì)胞
組織來(lái)源：滑膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人滑膜采用混合酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人滑膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;V79 卵巢癌細(xì)胞，SK-OV-3細(xì)胞 WCF細(xì)胞，團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞 | Adenylosuccinate Lyase： 腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體 0.2ml |
Anti-T7 tag T7 tag標(biāo)簽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABHD3 肺α/β水解酶蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Caspase-10/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶-10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10抗體 規(guī)格 0.2ml |
MTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受體(抗原) 0.5mg | HRG Beta1： 膠質(zhì)生長(zhǎng)因子/調(diào)節(jié)蛋白β抗體 0.1ml |
sIgA/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM166A FAM166A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF | A9 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 |
CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 |
786-0 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 | PDGFC Protein Mouse 重組小鼠 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24 | 大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2 |
Hep G2人肝癌細(xì)胞 Hep G2 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS | 人滑膜原代細(xì)胞Rhesus antibody Rh IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10抗體 規(guī)格 0.2ml |
C2C12(小鼠成肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | EREG Others Mouse 小鼠 EREG / epiregulin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
雜交瘤(B類(lèi));Z1510A2G6A2C7 急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞，MOLT-4細(xì)胞 H9c2(2-1)細(xì)胞，大鼠心肌細(xì)胞 | 酶(含100mL 酶解緩沖液) 10mL |
Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系 | Rhesus antibody Rh IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml |
LRP(Human Lung resistance-related protein) ELISA Kit 人肺耐藥蛋白 96T | KLE(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 細(xì)胞激酶信號(hào)-1抑制劑(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | SS(Human Somatostatin) ELISA Kit 人Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MRGX1： G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體 0.1ml | 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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